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                教育装备采购网
                第六届图卐书馆论坛580*60

                美华仪为您高度╲解析薄层色谱仪的原理

                教育装备采购网 2017-09-11 11:56 围观767次

                  薄层扫描仪是可以对斑点行扫描的用分光光度计,用可见光或紫外光作光源,线性扫描或锯齿扫描薄层板展开后的斑点,该斑点就吸收该组分征波长的单色光,剩余的单色光经透射或反射或发射荧光,由检测器积分起来,获得这块斑点面积的待测物质含量。

                  原理

                  薄层色谱又叫薄板层析,是︼色谱法中的种,是快速分离和定性分析少量物质的种很重要的实验,属固—液吸附色谱。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另方面在制作薄层板时,把吸附层卐加厚加大,因此,又◣可用来精制样品,此法别适用于挥发性较小∩或较温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。此外,薄层色谱法还●可用来跟踪有机反应及行柱色谱之前的种“预试”。

                  薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的种微量、快速而简单的▅色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。方¤面适用于小量样品(几到几十⊙微克,甚至0.01μg)的分离;另方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成条线,则可分离多达500mg的样品。因此又可用来精制样品。故此法别适用∞于挥发性较小或在较温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资♀。此外,在行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否成。

                  薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂层吸附剂或支持剂→,带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄▓层板端约1cm处的起♀点线上,凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的⊙展开槽内,浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂Ψ,或在紫外灯下显色。

                  薄层色谱仪包括:薄层层≡板点样器、手动涂布台、干燥储备箱、洗板架、紫外光探测器。可以快速分离︽脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质。

                  类别

                  1.离心薄层色谱仪 2.棒状薄层色谱仪 3.手动薄层色谱仪【 4.双波长薄层色谱扫描仪 5.全自动薄层【色谱仪 6.旋转薄层色谱仪 7.全波长薄层色谱仪 8.型薄层色谱仪 9.二管阵列薄层色谱扫描】仪 10.加压薄层色谱仪 11.暗箱式薄层色¤谱摄影仪

                  用途

                  适用于化学、化工、医药、临床、农业、食品、毒理等域内的各种化合物的分№离、精制、定性鉴别、杂质检查和含量测定。

                  操作方法

                  (1) 薄层板制备 除另ω有规定外,将1份固◣定相和3份水在研钵中向方向研磨混合,

                  去除表面的气泡╳后,倒入■涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器行涂布(厚度为0.2~

                  0.3mm),取下涂〖好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置

                  有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和∩反射光检视)。

                  (2) 点样 除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,般为圆点,点样基线♂距底

                  边2.0cm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为

                  宜。点样时注意勿损伤薄层表面。

                  (3) 展开 展开缸如需预用展开剂饱和,可在缸中加入足够量的展∞开剂,并在壁

                  上贴二条与缸样、宽的★滤纸条,端浸入展开剂□ 中,密封缸的盖,使系统平衡■或

                  按正文规定操作。

                  将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展◣开剂的深度为距薄层板底边0.5

                  ~1.0cm(切勿将样点浸入展开※剂中),密封缸盖,待展开至规定距离(般为10~15cm),

                  取出薄①层板,晾干,按各品种项下的规定检测。

                  (4) 如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描

                  定量,则可用薄层扫描法。

                  薄层扫描↑的方法,除另有规定外,可根据各种薄≡层扫描仪的结构点及】使用说明,

                  结合具体情况,选择吸收法♂或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果

                  的因素很多,故应在保证供试品的斑点△在定浓度范围内呈线性的情况下,将※供试品与

                  对照品在同块薄层上展开后扫描,行并计算定量,以减少误差。各种供试品,

                  只有∑ 得到分离度和重现性好的薄层色谱,才能获得满意的结果。

                  洗脱后●测定法

                  薄层经█展开后用刮刀或捕集器将斑点的吸附剂捕集后,再用〗适当有机溶剂洗脱,然后用可见、紫外分光光度法、荧光分光光度法测定含量。

                  但样@品斑点不能喷显色剂,以免影响不测▼定,斑点位置的确定方法。

                  样品在紫外线下发射々荧光的,可在紫外灯下观察斑点并用针划去斑点位置。

                  用碘蒸汽显色,在组分处理出棕色斑点(碘吸附后会ㄨ挥发)。

                  用标准物对照,将标ξ 准点于边上测显色时,盖住样品,定出斑点位置。

                  折

                点击进入北京美华仪科技有限公司展台查看更多 来源:教育装备采购网 作者:北京美华仪科技有限公司 责任编辑:云燕 我要投稿
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