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                古朵生物详解:ELIAS试剂盒实验条〗件

                教育装备采购网 2016-03-28 16:37 围观1337次

                  古朵生物详解:ELIAS试剂盒实验条件

                  1. 固ξ相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如∩聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙→酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前◤均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此◎判明其吸附性能是否良好。

                  2.包被抗体或抗原的选择:将抗体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸□附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一※定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条▓件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

                  3. 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直→接ELISA法进卐行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法”,在正式实验系统▽里准确地滴定其工作浓度。

                  4. 酶的底物↓及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉▅、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢ζ体,如TMB和ABTS是目前较『为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

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