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                动物组织样本的前处理

                教育装备采购网 2015-07-27 09:43 围观413次
                一、匀浆介质的制备:一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。二、组织匀浆的制备1、取组织块(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例【加入9倍体▆积的匀浆介质(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化钠溶液)或者0.86%的生理盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。3、匀〗浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入ω盛有冰水混合物的器皿中,右手』将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌★肉组织等可延长匀浆时间。③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。 镜检观察:取少量组织匀浆◣作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是〓否破碎,若没有则可延长匀浆时间。4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定※.三、样本保存: 动物组织样本暂时不测定,可立即≡低温冻存,温︾度越低越好,中间如不反复冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。 制备好的匀浆液建议不要冻存,最好当〇天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所」下降,部分指标4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,总蛋白测定可存5~7天等)最新产品:bs-0646R CD34抗体|CD34bs-1100R CD36抗体|CD36bs-7087R 凋亡加强结构域蛋白6抗体|CARD6bs-7090R 凋亡加强结构域蛋白17抗体|CARD17bs-7085R 凋亡加强结构域蛋白4抗体|CARD4bs-15192R 4号染∏色体开放阅读框34抗体|C4orf34 bs-9080R 酪蛋白∑ 激酶1γ3/CKI γ3抗体|CKI gamma 3bs-7089R 凋亡加强结构域蛋白9抗体|CARD9bs-13920R 胆固醇氧化酶抗体▂|Cholesterol Oxidasebs-6859R 半胱〖胺酸蛋白酶①蛋白14抗体|Caspase 14bs-6860R 半胱胺酸蛋白█酶蛋白5抗体|Caspase 5bs-10045R 猪瘟病毒抗体|CSFVbs-10045M 猪瘟病毒抗体|CSFVbs-12120R 嗜铬粒蛋白C抗体|Chromogranin C/Sg IIbs-12111R 烟碱型乙酰胆碱受@体α10/AChRα10抗体|CHRNA10bs-12112R 烟碱型△乙酰胆碱受体α6/AChRα6抗体|CHRNA6bs-12113R 烟碱型乙酰胆碱受体α9/AChRα9抗体|CHRNA9bs-12114R 烟碱型乙酰胆碱受体δ/AChRδ抗体|CHRNDbs-7088R 凋亡加强结构域蛋白8抗体|CARD8bs-6854R 凋亡加强结构域蛋白7抗体|CARD7bs-6857R β衣被蛋白抗体|beta COPbs-6858R 半胱胺酸蛋白酶4/11抗体|Caspase 4+Caspase 11bs-9220R 1号染色体开放ξ 阅读框187抗体|C1orf187bs-15334R 9号染色体◎开放阅读框61抗体|C9orf61bs-6315R C末端←结合蛋白2抗体|CTBP2bs-15123R 21号染色体开放阅读框13抗体|C21ORF13bs-6799R 冠蛋白3抗体|Coronin 3bs-9739R 细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体|CNTDbs-6480R 胆固醇25羟化酶抗体|CH25Hbs-6368R 天冬氨酸-胱氨酸特♀异性蛋白酶家族抗体|Caspase-1 p20bs-12164R 钙营养蛋白【1/钙结合蛋白8抗体|Calneuron 1bs-12160R 钙结合蛋白5/3抗体|CABP5bs-10125R CD98轻链抗体|SLC7A5bs-10104R 胰辅脂酶抗体|CLPSbs-9837R 17号染色体开放阅读框104抗体|C17orf104bs-12145R 卡因和安非他明调节转录蛋白抗体|CARTbs-1290R 富半胱氨酸肝素结合∴蛋白61抗体|CCN1bs-15156R 2号染色体开放阅读框65抗体|C2orf65bs-7658R β连环︼蛋白样蛋白1抗体|CTNNBL1bs-6795R 阳离子转运调控样蛋白1抗体|CHAC1bs-7649R DNA断裂因子相似蛋白A抗体|CIDE Abs-7650R DNA断裂因子相似蛋白B抗体|CIDE Bbs-6797R 顺氯氨铂耐药相关蛋白9抗体|CRR9bs-15139R 22号染色体开放阅读框40抗体|C22orf40bs-1762R 嗜酸粒细胞√趋化蛋白3抗体|CCL26bs-15124R 21号染色体开放阅读框33抗体|C21orf33bs-1772R 细胞角蛋白15抗体|CK15bs-1792R 细胞角蛋白14抗体|CK14+17+42+10bs-1797R 神经细胞NB3特定蛋白抗体|Contactin 6bs-1777R 促胃泌素受体抗体|CCKBRbsm-2117M 可卡※因单克隆抗体|Cocaine(C2F1)bs-15159R 2号染色体开放阅读框72抗体|C2orf72bs-1821R 细胞间粘附分子3抗体|ICAM3bs-3500R 染色质结合蛋白Cbx8抗体|Cbx8bs-2174R 降钙素抗体|Calcitoninbs-1860R 降钙素基因相关肽1型受体抗体|CRLRbs-4755R CD19抗体|CD19bs-4787R 磷酸化CD19抗体|phospho-CD19(Ser227)bs-1666R 淋巴细胞趋化因子CCL21抗体|CCL21bs-1671R 细胞表面趋╱化因子受体2A抗体|CCR-2Abs-1667R 细胞■表面趋化因子受体2B抗体|CCR-2Bbs-1629R 细胞表面趋化因子受体2抗体|CXCR2bs-2402R 金属肽链内切酶抗体|CD10bs-1589R 钙介质素抗体|Caldesmonbs-1542R 细胞表面趋化因子受体6抗体|CCR6bs-2453R 胸腺活化调节趋化因子抗体|ABCD2bs-0084M 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)|Caspase-6 (NT)bs-1579R CSMD1抗体|CSMD1bs-1038R 烟碱型乙酰胆碱受体α4抗体|CHRNA4bs-1788R 细胞表面趋化因子受体9抗体|CCR9bs-3598R 细胞表面趋化因子受体5抗体|CXCR5bs-3595R 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体|Cystatin Cbs-0697R C-藻蓝素/藻蓝蛋白/藻青蛋白抗体|c-phycocyaninbs-1606R 细胞色素P450 1A1抗体|CYP1A1/AHRRbs-1607R 丝/苏氨酸蛋白质激酶II α抗体|CK II alphabs-15157R 2号染色体开放阅读框66抗体|C2orf66 bs-0614R CULLIN抗体|Cullinbs-0313R 小牛胸腺DNA抗体|calf thymus DNAbs-15060R 1号染色体开放阅读框226抗体|C1orf226bs-1508R 组织蛋白】酶L抗体|Cathepsin Lbs-2937R 丝/苏氨酸蛋白激酶II β抗体(casein kinase IIβ)|CK II betabs-2043R 细胞角蛋白18抗体|CK18bs-6067R 转化生长因子β1结合蛋白抗体|CD109bs-15141R 22号染色体开放阅读框45抗体|C22orf45bs-15136R 22号染色体开放阅读框32抗体|C22orf32bs-2487R CD5L抗体|CD5Lbs-2488R CD6抗体|CD6bs-2489R CD9蛋白抗体|CD9bs-2490R CD23/FcεRII抗体|CD23bs-2491R CD27抗体|CD27
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