一、柠檬酸钠法1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。2. 微波中高火6-8min。3. 室温冷却。4. 用PBS洗涤3次，每次5min。二、蛋白酶K法1. 配制新鲜溶液：25μl 20mg/ml蛋白酶K；2.5ml 1MTris-HCl（pH8.0）；0.5ml 0.5M EDTA（pH8.0）；加水定容□到50ml。2. 37℃下，将玻片放在架子上孵育5min（蛋白酶K不要预热）。3. 用PBS洗涤3次，每次5min。三、尿素法1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml 的1M尿素（新鲜配制）的容器中。2. 微波10min，20min或者30min，每5min补充一次蒸发掉的水。3. 冷却30min到1h。4. 用蒸馏水洗涤4次，每次3min,再用PBS洗涤3min。