人肾损伤分子-1（Kim-1）酶联免疫分←析(ELISA)试剂盒使用说明书? 本试剂盒仅供科研使用。? 本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、组织、细★胞上清及相关液体样本中肾损伤分子-1（Kim-1）的含量。? 有效期：6个月? 保存条件：2-8℃实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肾损伤分子-1（Kim-1）水平。用纯化的人肾损伤分子-1（Kim-1）抗体包被№微孔板，制成固相◣抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肾损伤分子-1（Kim-1），再与HRP标记的人肾损伤分子-1（Kim-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复〓合物，经过彻底①洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用ㄨ下转化成最终的黄色。颜色的深浅和≡样品中的肾损伤分子-1（Kim-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肾损伤分子-1（Kim-1）浓度。试♂剂盒组成试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存〇说明书 1份 1份 R.T.封板膜 2片（48） 2片（96） R.T.密封袋 1个 1个 R.T.酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存标准品：1350 pg/ml 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存标▲准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存酶标试剂※ 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂▂ぷA液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存样本处理及要求1. 血清：室温血液自】然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上□清，保存过程中如出现沉淀，应再■次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作々为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上＠清，保存过程中如有沉淀形□　成，应该再次ξ　离心。3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上▃清，保存过程中如有＠ 沉淀形成，应再次离∮心。胸腹水、脑脊♀液参照实行。4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释︻细胞悬液，细胞︼浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后→仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆●充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关▲文献进行，提取后应尽╱快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.