对于液相色谱仪的柱压高,首先第一个想到的是堵,一是考虑的是仪器管路问题,二是考虑的是色谱柱问题,需要逐一进行排除:
1.拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
2.把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降正常,则是色谱柱堵塞问题;
3.针对色谱柱缓冲液盐分沉积于柱内堵塞;建议把柱子好好ζ冲一次,用100%甲醇-70甲醇-50甲醇-30甲醇-水冲,然后再按照这个顺序︻反着冲,每个流动相冲半个小时, 之后用纯甲醇开始冲洗柱子 30 分钟;
4.由于分析样品污染沉积堵塞。对于这种沉积污染的C18柱,用纯水反向冲「洗柱子, 使用二氯甲烷:甲醇:氨水=96:4:1冲洗效果不错。配¤置时先用甲醇把氨水溶解了再加二氯甲烷,使用这个流动相要注意其与上个使用和下个使用的流动相是否相容的问题。也可以换成甲醇冲洗,接着用甲醇 异丙醇冲洗▆柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定) ,再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
5.既无压力指示,又无液△体流过的原因:(1) 泵密封垫圈磨损;更换密封垫圈; (2) 大量气ㄨ泡进入泵体。在泵作用的同时, 用一个玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。