Elisa实验结果的影响因素包括检测样品因素、操作因素等。在实〓验操作的过程中有一些技术要点,在这里,上海恒远生物公司为大家分享操作Elisa试剂盒的11条实验禁忌(供参考):
1.加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
2.作时必须戴手套,穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度。
3.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
4.同批号试剂组分不※得混用。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.每次实验留一孔作为空◣白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
7.要确保微量加样器的准确性,可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水可≡以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其最高量程和最低量程进行确定。
8.在使用Ψ 微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
9.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。
10.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止⊙交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
11.底物为TMB,避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性,应尽量避免接触皮肤。
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