在昨天的技术资料中,上海恒远生物为大家介绍了ELISA试剂盒的OD值范围,当日下午有客户来电咨询相关技术,并夸赞我公司服务的完善与优质。今天我公司为大家带来的是ELISA实验常见问题的最新对策,一起来看下。
一、阴性样本的吸光度值低于阳性吸光度值原因
可能原因是出现跳孔的现象或酶标板孔中的试剂未充分的混合。解决的办法是注意操作的方法,注意洗涤时的方法、加完试剂后可将酶标板在桌子上平行轻轻晃ξ动30s,混匀液体。
二、吸光度值偏高是怎么回事
可能引起的原因有孵育的温度过高、反应的时间过长。相☆对应的解决办法是调整孵育环境的温度,如无法调整室内的温度,请︽将显色时间适当的缩短、控制反应时间。
三、样品的稀释
样品稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂★在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。
ELISA反应是一种敏感性很高〓的反应,如果血『清不稀释,不¤可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的试剂盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的↘抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些〇产品应取10μl样品进▲行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以「及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。
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