ELISA实验步骤繁琐,操作者们所犯的问题也各⌒有不同。日前下午,辽宁中医药大学赵老师联系到上海恒远何经理咨询问道:为什么ELISA标准品会出现“溢值”的现象呢?看到问题后,何经〓理立即转到技术部,5分钟后,上海恒远公司技术部给赵老师去电话,解析造成ELISA试剂盒标准品溢值的原因:
① 样品/标准品不正确稀释。
② 孵育时间/温度不㊣ 正确。
③ 在孵育时为盖上酶联板覆盖物:在孵育时需盖上酶联々板覆盖物,以防止液体蒸发或孵育期间的污染。每个试剂盒内均有足够数量的酶联板覆盖物。
④ 检测波长不正确:要保证分光光度剂的检测波长是正确的。
⑤ TMB底物的显色时间过长:请监控◤显色时间。说明书中所示的显色时间可能因为温度和其它检测条件的不同而稍∴有变化。
⑥ 样品不适■合此检测:在说明书中会列出每种产品的适用标本范围,超出范围的标本可能不适于此试剂盒或者检测条件需要摸索。
⑦ 样品/标准品污染:样品或标准品▓的污染可能会导致检测结果“溢值”。
⑧ 偶合试ㄨ剂不正确稀释:要严格按照说明书来稀释偶合试剂,浓度过卐高会造成OD的“溢值”HRP偶合试剂的不正确稀释
⑨ 所用稀释液不对:只能使用相应试剂盒内的稀释液稀释样品和标准品←。
找到问题原因后,解决问题※就容易的多了。各〇位朋友们也是一样♂,在检测的时候一定要认真仔细,并严格按照要求来操作。实验前,对ELISA试剂盒说明书仔细的阅读。上海恒远祝大家实验成功!