咨询客户：张老师
所在单位：厦门大学
咨询问题：交联葡聚糖凝胶使用方法?
答：
1. 乙醇浸泡：
在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干;
2.无盐水浸泡：
室温下，在无╲盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的完全溶胀，然后;
3. 盐酸浸泡：
在常温下再用0.2N HCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗至中性;
4. 将溶胀好的凝胶※脱气后(真空●抽滤或超声波)根据〗装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层;
5. 上样前平衡层析柱至少3-5 个柱体积直到记录仪基线变得平稳♂为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer 的PH值);
6. 凝胶＠过滤的上样量一般为5%的△柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20% 的Ψ 柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制▂在40-50cm 以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径▓比为5：1 即可;
7. 洗脱方法：
可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓◥冲液洗脱↓;在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离∩纯化;
8. 在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氢氧化钠反向洗四个柱体积
