从蛋清中提取的亲和素可想而知是一种蛋白质，它是由4个亚基组成，所以可以和4各分子紧密的联系。亲和素ELISA试剂盒就是利用这个特性检测生物中的某些特性的。目前大多数的亲和素都是从链霉菌中提取的，也称为维生素H，存在于蛋黄中，它的分子量为244.31。用化学方法制成的衍生物，生物素-羟基琥珀亚胺酯(BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素。亲和素与生物素的结合，虽不属免疫反应，但特异性强，亲和力大，两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置，可以连接更多的生物素化的分子，形成一种类似晶格▂的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA试剂盒偶联起来，就可大大提高ELISA试剂盒的敏感度.
在ELISA试剂盒中亲和素-生物素的应用有很多种，可以是最终反映将结果放大，也可以是间接法。也可以在固相上先预包被亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合，通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法＠ 不仅可增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。另外，在常规ELISA试剂盒中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代，然后连接亲和素-酶结合物，以放大反应信号。
