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                鸡脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

                教育▲装备采购网 2014-09-29 10:47 围观239次
                鸡脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的:本试剂盒 用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)表达。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中鸡脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)表达。用纯化的抗原包被▓微孔板,制成固相抗原,可与样品中脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗♀原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪↑在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF相比较,从而判定标本中鸡脑脊髓炎病毒抗∮体(AEV Ab)的存在与否。试剂盒 组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶3 酶︼标包被板 12 孔×8 条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶4 样品稀∩释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1.标本采集后尽早进♂行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验》。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能☆检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1. 编号:将样品对应微孔№按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及▃酶标试剂,其余各步操作相同◆)2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再↙加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不╱触及孔壁,轻轻晃动混匀,3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用∑5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔』加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入√显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液㊣ 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零∏,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内●进行。计算和结果判定:试验有效〓性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD 值< 临界值(CUT OFF)者为脑々脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)阴性阳性判定:样品OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为脑脊髓炎病毒抗体(AEV Ab)阳性注意〓事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组〓分不得混用。2.试剂盒 从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包☉被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤▲液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污◥染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读※数为准,使用双波长检测时,参考↑波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M 的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保▓存:;2-8℃。2.有效期:6 个月__郑州唯尔生物科技有限公司是一家集科研、生产、销售为一体的综合性企业,公司业务广泛涉及到生物制剂、化工试剂及化工原料、临床前检测用及耗材、elisa试剂盒、抗体、标准品、培养基等多》种生物制品。种类齐全,质量值得信赖,欢迎新老客户前来垂询!!!
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