和野生动物一样，细胞也会从一个地方迁移到另一个地方。虽然细胞迁移的原因还不明确，但它有助于我们理解正常细胞发生、发展、分化、伤口愈合等过程，以及某些疾病，如癌症转移。细胞侵袭的一个特殊情况，就是细胞三维迁移。 从细胞水平上讲，细胞迁移和侵袭时往往会出现细胞粘着斑(整合素介导的细胞运动前缘的附着点)。借用粘着斑作为牵引点，细胞将自己拉向目的地。 为了研究控制这些过程的复杂信号，已经开发了多种细胞迁移╳检测方法，比如，测量从起始位置移动到结束位置的细胞的□ 数量(也可⌒以是动态测量)。四种主要的细胞迁移实验分别为：跨膜/ Boyden小室、细胞划痕实验、细胞隔离迁移实验(也称为二维细胞迁移实验或缺口封闭实验)和微流体技术。选择何种检测结束需要对这些检测方法有一定的了解，并且明确你需要什么样的数据Ψ 。了却以下问题将♀有利于细胞迁移检测方法的选择。
什么时候该使用跨膜/Boyden小室?
跨膜/Boyden小室是最常用的细胞迁移检测方法，该方法始于20世纪60年代，以S.V.Boyden的名字命名，小室被中间的微孔滤膜(通常涂有细胞外基质蛋白)分隔成两个腔。通常是在细胞培养板空中放置一聚碳¤酸酯细胞培养嵌套Ψ，嵌套底部为⊙滤膜。检测时将细胞放置在一个腔中(或种植在膜的一侧)，在另一腔内添加趋化剂(或抑制剂)。 受趋化剂影响，细胞穿过膜中的小孔迁移，之后你就可以使用显微镜观察细胞迁移情况。该实验类型的优点在于，你可以使用∞贴壁细胞或悬浮细胞，并可以测试趋化梯度下的迁移情况。 该方法缺点是，趋化剂的浓度梯度是未知和可变的◥，而且该方法只能做终点观察，很难看到动态变化过程(虽然这种情况正在改进，下文将会提到)。同时，细胞迁移后的人工计数也是相当乏味的，各种迁移细胞标签技术也正在发展中。Cell Biolabs公司称，“我们在进行细胞标签时是非常谨慎的，以为标签后的细胞迁移▓属性有可能发生改变，从而导♀致错误结果。” Cell Biolabs公司的CytoSelect细胞迁移检测试剂盒(CytoSelect Cell MigrationAssays)能够实现细胞自动技术，但并未使用细胞标签技术，而是在完成细胞迁移后使用荧光染料进行技术。
BDBiosciences公司提供了另一种自动计数的解决方案，使用一种特殊的膜用来分隔小室。该公司的FluoroBlok细胞培养嵌套(BD FluoroBlok Cell CultureInserts)含有“轻紧”型膜结构，能够阻止490-700nn的光线穿透。因此，研究人员可以在底部小室检测荧光，而光线不会到达小室顶端。使用BD FluoroBlok系统，如果荧光标记的细胞穿过滤膜，就可以自动被底部的荧光读板系统或荧光显微镜读取。该方法能够用于动态观察细胞迁移状况，而不仅仅用于终点分析。
BDBioSciences公司利用其FluoroBlok技术，还提供了多种应用。比如，BD BioCoat? AngiogenesisSystem: Endothelial Cell Migration，它涂有㊣人纤维连接蛋白，用于检测内皮细胞的迁移状〖况。BD FluoroBlok Insert 系统经常用于肿瘤细胞、内皮细胞迁移和侵袭检测。
什么时候该使用细胞划痕实验?
细胞划痕实验又称伤口愈合实验，是指将细胞培养在培养皿或平板上，待细胞融合后在中央区域画一条线，这条线内的细胞被机械力去除掉了，然后将细胞继续培养，观察细胞向〒无细胞的划痕区域迁移的情况，来判断细胞的迁移能力。最近，一些公司比如Essen BioScience提供自动化的细胞划痕工具，以提高可重复性。该公司的CellPlayer迁移检测试剂盒( Essen’s CellPlayer? Migration Assay)是96孔板划痕检测系统。该板的优势在于使用简单，可以实时记录细胞迁移情况。但由于不同实验室可能会使用不同的划痕实验方法，而且即使使用自动设☆备也难以难以精确控制划痕区域，因此实验组和对照组的划痕可能一致。
划痕还可能会损坏细胞下的细胞外基质。EMD Millipore公司指出，划痕实验在研究细胞骨架结构和细胞极性时十分有用，但由于使用的器具并不统一，因此其中的可变因素较多。比如，划痕的ω大小和宽度不一致，从而影响实验结果的可重复性和一致性。而且，划痕边缘的细胞可♂能会受到损伤，从而导致迁移困难。另一方面，划痕实验无法进行可溶性因子和化学趋化剂的梯度研究。损伤的细胞可能会释放某些物质进入培养基中，从而影响其他细胞。
什么时候该使用细胞¤隔离迁移实验?
细胞隔离迁移实验和划痕实验类似，检测细胞迁移进入★无细胞区域的状况，只是不ω 会出现划痕实验中的“伤口”(细胞刮伤)。细胞在培养孔底部生长，其周围放置抑制细胞在某个区域生长的物质，比如在培养孔中间放置小塞子，以产出无细胞区域。实验开始时移除小塞子，研究人员就可以观察细胞迁移至无细胞区域。该方法的优点是可以连续地观察细胞运动，不存在细胞损※伤，而且研究人员可▲以添加某些基质，观察〓细胞的三维迁移。其缺点包括不能观察悬浮细胞或趋化梯度(Boyden小室可以测定)。
PlatypusTechnologies和Cell Biolabs公司使用多孔板用于细胞隔离迁移检测。Platypus最近推出高通量的兼容性检测方案，可以通过显微镜或高内涵的成像仪器读取数据。Platypus公司指出，“我们最近推出的ORIS Pro 384孔细胞迁移检测试剂盒完全实现自动化，既有适合组织培养处理的表面，也有I型胶原蛋白处】理的表面。ORIS Pro 384是对96孔和小塞为基础的检测方式的改进，配合其高度自动化配置，尤其适用于高通量筛选。ORIS Pro 384在培养孔底部放置生物相容性凝胶，不需要提前放置小塞，也不需要使用药物或手工移除小塞。随着高内涵分析仪器和多△参数的读数仪器」的到来，研究∞人员可以观察细胞的表型。”
什么时候需要微流体←检测?
基于微流体设备的细胞迁移检测也日益普及。设备间的区别在于它们的构造的，但一般微流体设备都含有一连接两端的通道。研究人员可在一端加入，细胞可在底部生长。然后∑ 在另一侧加入趋化剂，使用显微镜观察细胞迁ξ 移状况。微流体检测的优点在于，研究人█员可以节约宝贵的试剂和细胞(昂贵的药物或罕见的原代细胞)，研究人员还能够产生线性浓度梯度(和Boyden小室相反)。其缺点为由于体积较小，为保持细胞活性，可能需要频繁换液。
EMDMillipore公司最近公布了一种微流体迁移实验盒，该产品可单独使用，或和该公司的Boyden Chamber QCM?迁□移和入侵检测试剂盒配合使用。 “我们公司最◇近推出的Millicell μ-migration Assay Kit，该产品可实时观〒察单细胞迁移情况。能够测量参数，如细胞的移动速度、方向和迁移指数等，该产品支持稳定的线性浓度梯度，持续时间超过48小时。因此，研究人员可以区分趋化①和随机运动下细胞的慢速和快速迁移细。该试ξ 剂盒还可以使用荧光标记的细胞。”
“六月，EMD Millipore公司将公□ 布QCM Invadopodia检测试剂盒，该产品含有癌变物质invadopodia，可引发肿瘤细胞迁移，它是第一个也是目前唯一一个能可视化定量检测各种分子对ECM降解作用的试剂盒〓。该试剂盒可在玻璃培养表◥面形成一层薄膜，相容性试剂◣能将肌动蛋白、细胞核和invadopodial退化位点共定位，可用于检测invadopodia抑※制剂和增强剂的活性，从而分析各种细胞类型的侵袭能力。该试剂盒有红色和绿色两种颜色可供选择。
Platypus公司指出，“由于许多研究人员都在研究抗癌机制，细胞迁移检测产品也应该更接近生理状态。三维的细胞∴迁移检测可能更接近生理状态。同时，细胞在不同的培养表面上可能会产生不同的信号▅，细胞表面可能一部分和↘基质接触，而另一部分╳和培养液接触。我们的细胞迁移产品更倾向于将细胞的所有部分都埋入基质中。我们还需要不断地研究，以期开发成更多的检测模型。”
