色素提取正交试验设计:按照正交试验设计L9(34),将单因素试验中优选的提取条件即温度、功率、时间、物料比,4个因素分成◇3个水平,综合考察超声对提取切花菊花红色素的影响。吸光度值测定:根据朗伯-比尔定律A=Ebc,即A=Kc,以全光谱800200nm扫描,以实验测定的最大吸收波长531nm(pH由测得的数据可知,菊红色素溶液在乙醇溶液中的吸光度比在乙醇-盐酸溶液中的吸光度小很多。
因此,最佳的提取溶剂中应加入一定体积的盐酸,因为酸性溶剂在破坏植物ξ 细胞膜的同时,还溶解水溶性的色素,所以提取率会高。提取溶剂的选择溶剂溶解性吸光度溶剂溶解性吸光度蒸馏水溶解1.10330%乙醇HCL溶解2.21830%乙醇溶解0.81550%乙醇HCL溶解2.38450%乙醇溶解0.65070%乙醇HCL溶解2.62270%乙醇溶解0.53395%乙醇HCL微溶)95%乙醇不溶)丙酮不溶)注:酸溶液浓度为0.1molL-1盐酸。不同醇酸『体积比的选择:准确称取6份菊花粉末各1g,加入20mL质量分数分别为30%、40%、50%、60%、70%、80%的无水乙醇和浓度为0.1molL-1的盐酸提取剂,在温度40e,功率为250W,时间为30min的提取条件下进行超声提取》。
随着乙醇质量分数的增加,所对应的吸光度分别为1.245、1.268、1.343、1.447、1.542、0.575,其中,70%的乙醇-盐酸溶液︽的提取率最高,但超过70%以后提取率明显下降。温度的选择:准确称取5份菊花粉末各1g,加入20mL的70%乙醇和浓度0.1molL-1HCl溶液,分别在温度为30、40、50、60、70e,功率为250W,时间为30min提取条件下进行超声提取。
随着温度的升高,提取率随之增加,所对应的吸光度分别为1.244、1.478、1.746、1.966、1.960,但是当温度超过60e以后,抽滤的液体出现混浊现象,而且温度过高会导致红色素分解。正交试验按照正交试验1设计L9(34)。将单因素试验中优选的提取条件设为超声水浴▅温度、超声功率、超声提取时间和物料比4个因素分成3个水平,考察对超声提取花青素的影响,根据吸光度比较提取效果。
结论通过↑以上试验分析,对切花菊红色素提取溶剂的选择确定为质量分数为70%乙醇和浓度为0.1molL-1盐酸溶液;在对温度选择时吸光度值随着温度的升高而增加,但是因为花青素类物质容易分解,所以要〒控制好提取时的温度,不宜太高,不能超过60e;在对时间选择时,超生提取时→间过长反而会影响色素的提取率,当时间在30min时吸光值最大;在物料比选择时,总的趋势是吸光值随着加入提取溶剂的增多而变大,这说明溶剂的增加使切花菊红色素溶解』的更充分,但是考虑到节省原料的因素,最好选择合适的物料比为1B30.