细胞融合是杂交瘤技术的中心环节，基本步骤是将两种细胞混合后加入PEG使细胞彼此融合。然后用培养液稀释PEG，消除PEG的作用。将融合后的细胞适当稀释，分置培养板孔中培养。融合过程中有3个问题应特别注意，①细胞比例，骨髓瘤细胞与脾细胞的比值可从1：2到1：10不等，常用1：4的比例。应保证两种细胞在融合前都具有较高活性。②反应时间，在两种细胞的混合细胞悬液中，第1分钟滴加4。5ml培养液；间隔2rain滴加5ml培养液，然后加培养液50ml。③培养液的成〓分，良好的培养液对融合细胞尤其重要，其中的小牛血清、各︽种离子和营养成分均需严格配制。如融合效率降低，应随时核查培养基情况。
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