DNA提取试剂←盒新闻——肺癌外周血检测可指导个体化治疗
对原发肿瘤反复进行组织活检有时候并不方⊙便,无论在伦理还是实际操作上均有一定难度,并且○可能延误治疗和导致并发症的产生。因此,利用外周血（游离DNA、循环肿瘤细胞等）建立实时、动态、无创、定量的分子检测体系有重要的意义。目前国际上多个研究小组更多的探寻利用外周血游离DNA或循环肿瘤细胞行全基因组/外显子组分析以指导个体化治疗的可行性。
肿瘤是基因组☉疾病,故单〗一基因检测难以满足指导个体化↘治疗的需要。近期【多项研究利用二代测序技术分析了血浆游离DNA基因组、外显子组改变∏与治疗疗效的关系。循环肿瘤细胞是有关外周血分子标志物研究的另一焦点。其作为完整的、无损伤的肿瘤∴细胞,能反映肿瘤的转移、耐药、进▲展等过程。
在该研究中,研究人员比较了循环肿瘤细胞中基于血液KRAS突变分析和循▆环血浆DNA（用DNA提取试剂盒进行提取）用于预测肺癌▓原发性肿瘤突变这两种方法来替代组织活检■的可行性。
研究人员通过▃利用cobas4800（罗氏）等位基卐因特异性PCR技术检测肺癌患者KRAS突变状态,该技术的原理是在基因组的某些非↓编码区,一些短的序列 ( 十几至一百多个碱基 ) 可重①复多次,并按照孟德※尔遗传法则呈共显性遗传。这种等位基因的多态性常达十个以上,因此这种遗传标记带有々很大的信息量。除了等位基因的遗传←多态性分析外,还应用于点突变的检测。
通常只需采集病人9ml血标本就可以检测▅,利用ScreenCell MB装置捕获循环肿瘤细胞,DNA通过人ξ 类组织和细胞DNA提⊙取试剂盒从循环肿瘤细胞中提取出。通过自定义设计的高分辨率溶解法检测KRAS基因突变,并通过QIAGEN试剂盒进行焦☉磷酸测序。
91例接受肺癌切除手术患者中,通过福尔╲马林固定石蜡包埋（FFPE）进行组织活检的18例,通过外周血游离DNA检测的17例,循环肿瘤细胞检测〖的47例。研究发现,以血液为基础检测KRAS突变◇试验中,外周血游离DNA检测的敏感度和特异度分别为81%、97%；循环肿瘤细胞检测〖的敏感度和特异度分别为86%、38%。
该研究结ω 果表明,以血液为基础的突变试验用于预测肺癌原发性肿瘤基因突变是可︼行的。就肿瘤异质】性而言,与循环肿瘤细胞相比,循环肿瘤DNA（ctDNA）对肿瘤负荷的影响更大⌒,并且更密切说明了肿瘤的突变。
