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                教育▓装备采购网
                第六届图书馆论坛580*60

                卡迈舒生物今日推荐阅读-MS培养基母液的配置与保存

                教育装备采〗购网 2014-07-15 11:19 围观1815次

                仪器与用》具

                1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;

                2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签;

                3、试剂:95%酒精,0.1-1NNaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物,蒸馏水。

                方法步骤

                (一)母液的配制

                母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。

                优点:(1)保证各物质成分的准确性。

                (2)便于配置时快速←移取。

                (3)便于低温保藏。

                1、MS大量元素母液(10X)

                称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养●基取母液100ml。

                 

                化学药品

                1升量

                10升量

                NH4NO3

                1650 mg/L

                16.5g

                KNO3

                1900 mg/L

                19.0g

                CaCl2·2H2O

                440 mg/L

                4.4g

                MgSO4·7H2O

                370 mg/L

                3.7g

                KH2PO4

                170 mg/L

                1.7g

                 

                2、MS微量元素母液(100X)

                    称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升↘培养基取母液10ml。

                 

                化学药品

                1升量

                10升量

                MnSO4·4H2O

                ( MnSO4·H2O)

                22.3 mg/L

                (21.4 mg/L)

                223mg

                ZnSO4·7H2O

                8.6 mg/L

                86mg

                CoCl2·6H2O

                0.025mg/L

                0.25mg

                CuSO4·5H2O

                0.025 mg/L

                0.25mg

                Na2MoO4·2H2O

                0.25 mg/L

                2.5mg

                KI

                0.83 mg/L

                8.3 mg

                H3BO3

                6.2 mg/L

                62 mg

                注意:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25 mgX10=2.5mg)或100倍量(25mg)称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml(即含0.25mg的量)加入到母液中。

                3、MS铁盐母液(100X)

                称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养∏基取母液10ml。

                化学药品

                1升量

                10升量

                Na2·EDTA

                37.3 mg/L

                373 mg

                FeSO4·7H2O

                27.8 mg/L

                278 mg

                注意配制〓时,应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐ξ较难完全溶解,可适当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然▲后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,至产生深黄色溶液,最后定容,保∩存在棕色试剂瓶中。

                 

                 

                4、MS有机物母∏液(100X)

                称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

                 

                化学药品

                1升量

                10升量

                烟酸

                0.5 mg/L

                5mg

                盐酸吡哆素(VB6)

                0.5 mg/L

                5mg

                盐酸》硫胺素(VB1)

                 

                 

                肌醇

                100 mg/L

                1 g

                甘氨酸

                2 mg/L

                20mg

                 

                5、生长调节剂

                单独配制,浓度为1-5 mg/ml(书中为0.5-1mg/ml),一般配成4 mg/ml 。

                配制培养㊣ 基母液时注意事项:

                ①一些离子易发生沉淀,可先用少量蒸馏◥水溶解,在按配方顺序依次混合;

                ②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;

                ③药品应用化学纯々或分析纯;

                ④溶解生长素时,可用少量0.5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5–1N的HCl加热溶解。

                (二)母液↘的保存

                1、装瓶:将配制好的△母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液,放入棕色瓶中保存。

                2、贮藏:4℃冰箱。

                 

                MS培养基☉配方

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                成分

                分子量

                使用浓度(mg/L)

                 

                 

                大量元素

                硝酸钾 KNO3

                101.11

                1900

                 

                 

                硝酸铵 NH4NO3

                80.04

                1650

                 

                 

                磷酸二氢钾〓 KH2PO4

                136.09

                170

                 

                 

                硫酸镁 MgSO4.7H2O

                246.47

                370

                 

                 

                氯化钙 CaCl2.2H2O

                147.02

                440

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                微量元素

                碘化钾 KI

                166.01

                0.83

                 

                 

                硼酸 H3BO3

                61.83

                6.2

                 

                 

                硫酸锰 MnSO4.4H2O

                223.01

                22.3

                 

                 

                硫酸锌 ZnSO4.7 H2O

                287.54

                8.6

                 

                 

                钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O

                241.95

                0.25

                 

                 

                硫酸铜 CuSO4.5 H2O

                249.68

                0.025

                 

                 

                氯化钴 CoCl2.62

                237.93

                0.025

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                铁盐

                乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA

                372.25

                37.3

                 

                 

                硫酸亚铁 FeSO24.7H2O

                278.03

                27.8

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                有机成分

                肌醇

                 

                100

                 

                 

                甘氨酸

                 

                2

                 

                 

                盐酸硫胺素№ VB1

                 

                0.1

                 

                 

                盐酸吡哆醇 VB6

                 

                0.5

                 

                 

                烟酸 VB5或VPP

                 

                0.5

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                蔗糖 sucrose

                342.31

                30g/L

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                琼脂 agar

                 

                7 g/L

                 







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