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                人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒

                教育装备采购网 2014-06-10 13:08 围观1193次
                 

                【详细说明】


                人周期素依赖性激酶1(CDK-1)(ELISA试剂盒) ,英文缩写:CDK-1 ,英文名:CDK-1 ELISA Kit,人周期素依赖性激酶1(CDK-1)(ELISA试剂盒)规格:96T/48T,别名:人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒, 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA Kit, 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)检♀测试剂盒 ,其它别名:人周期素依赖性激酶1(CDK-1)酶联免疫试剂盒, 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)酶联免疫吸附试剂盒 

                ELISA实验主要方法类型和操作步骤详解:人周期素依赖性激酶1(CDK-1)(ELISA试剂盒)可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
                (一)双抗体夹心︽法
                双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:
                (a)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
                (b)加受检标本:使之与固相抗体接触反∏应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合¤的物质。
                (c)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
                (d)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应◣的程度进行该抗原的定性或定量。
                根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
                (二)一步法
                在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。
                在一步法测定中,应注意钩状效应(hookeffect),类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高◥时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可卐出现假阴性结果。
                (三)间接法测抗体
                间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
                (a)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
                (b)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
                (c)加酶卐标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用酶标羊抗人IgG抗体。
                (d)加底物显色:颜色深度代表标本中受检抗体的量。
                本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
                (四)竞争法
                竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下:
                (a)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。
                (b)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合☆的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。 
                (c)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中↙抗原含量越多。
                脑蛋白水解物供鉴别用Y26994140697-2006022ml
                盐酸半胱氨酸供鉴别与Y26995140699-201001100mg
                舍雷肽酶鉴别Y26996140700-20040125mg
                甘精胰岛素含量测定Y26997140701-2004015mg
                N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺含量测定Y26998140702-200501100mg
                去羟肌苷含量测定Y26999140703-200401100mg
                琥珀酰明胶含量测定Y27000140704-200401700mg
                L-谷氨酰胺HPLC法含量测定Y27001140705-200602600mg/支
                谷胱甘肽含量测定Y27002140706-200702200mg
                胸腺嘧啶有关物质检查Y27003140708-200401100mg
                环磷腺苷含量测定Y27004140709-20100350mg
                单磷酸阿糖腺苷UV法含量测定Y27005140710-20040120mg
                生长抑素HPLC法含量测定Y27006140711-200702256μg/支
                抗眼镜蛇毒原血浆(马源)检查Y27007140713-20050120mg
                脱氧核糖胞嘧啶核苷酸钠含量测定Y27008140715-20050120mg
                脱氧核糖腺嘌呤核苷酸钠含量测定Y27009140716-20050120mg
                脱氧核「糖胸腺嘧啶核苷酸钠 含量测定Y27010140717-20050120mg
                脱氧核糖鸟嘌呤核苷酸钠 含量测定Y27011140718-20050120mg
                一磷酸腺苷钠含量测定Y27012140719-20050120mg
                角鲨烯含量测定Y27013140721-2006010.5ml
                γ-氨酪酸鉴别Y27014140723-20050120mg
                胸腺五肽HPLC法含量测定Y27015140728-20080350mg
                赖脯胰岛素HPLC法含量测定Y27016140729-20050125mg
                醋酸奥曲肽HPLC法含量测定Y27017140730-2006020mg/4℃
                尤瑞克林鉴别用Y27018140731-2005011.6PNA单位/支
                门冬酰胺酶(大肠杆菌)供门冬酰胺酶鉴别用Y27019140732-2005015mg
                门冬酰胺酶(欧文菌)供门冬酰胺酶鉴别用Y27020140733-2005015mg
                鲑降钙素鉴别,有关物质检查Y27021140734-2005011mg
                5-胞苷酸检查Y27022140735-20050110mg
                4-羟基苯乙酸鉴别及含量测定Y27023140736-200501人周期素依赖性激酶1(CDK-1)(ELISA试剂盒) 10mg 

                5-羟基吲哚乙酸HPLC法含量测定Y27024140737-20050110mg
                马尿酸HPLC法含量测定Y27025140738-20050140mgELISA试剂盒基本原理
                1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一▓定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产卐物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使人周期素依赖性激酶1(CDK-1)(ELISA试剂盒)测定方法达到很高的敏感度。
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