上海【皓庄仪器有限公司皓庄(LNB)PCR是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连︻锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
基因扩增PCR仪的使用方法:
PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物●的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55~60℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚╳合酶的作用下,于70~75℃,以dNTP为反应原Ψ料,靶序列为模板,按碱基配对◥与半保留复制原理,合成一条新的与∴模板DNA链互补的半保留复制链♀重复循环变性--退火--延伸三过』程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成【一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
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