一、检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预∑先包被人总补体(CH50)捕获抗原的包被微孔中，依次加』入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催∏化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色〗的深浅和样品中的人总补体(CH50)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
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二、自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓々冲液加19份的蒸馏水。
5.手工洗板：甩尽孔内■液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
自动洗板机◥：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
三、操作步骤
1. 从室☆温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条■，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品◥50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中ㄨ（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体50μL，，用封板膜封住反应孔→，37℃水浴锅或恒温箱温育↘60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板√机洗板）。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止＠液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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