人甲状旁腺激素ELISA检测试剂盒(PTH)实验操作说明
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人甲状旁腺激素(PTH)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人甲状旁腺激素(PTH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下◣测定吸光度(OD 值),计ω算样品浓度。
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人甲状旁腺激素ELISA检测试剂盒(PTH)实验操作说明
操作步骤
1. 从ω室温平衡20min后的铝箔袋中取出所□ 需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样№本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅↑或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗※涤液,静置1min,甩去】洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处↑测定各孔的OD值。
人甲状旁腺激素ELISA检测试剂盒(PTH)实验操作说明
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