相关ELISA实验很多老师门都并不陌生,我们在先前的资讯中就给朋友们介绍到过许多,具体可以参见我公司的资讯动态。我们今天来看看ELSIA试剂盒重点之洗涤。
参数:
1、洗涤量。
自动洗板机会分配洗涤液,如果你之前遭遇过高背景,那么不要犹豫,将洗涤量调为高,最好是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到,从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。ELISA板的制造商通常会在试剂盒的使用手册中列出包被量。行业中通常使用的包被量是200 μl。如果你的试剂盒也是这样,那么制造商可能会々建议使用300 μl洗涤液进行洗涤,以便清洁整个反应∞孔的壁。一般来说,洗涤量越高,则孵育步骤残留的抗体或抗原量就越少。
2、洗涤循环的量:
洗涤次数越多,背景越低。然而,太多次的洗☉涤会降低信号强度,使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过,ELISA板的制造商会对洗涤次数提出建议。一般而言,制造商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板,必须优化洗涤次数。
朋友们在实验过程中应该仔细检查洗涤步骤,保证实验的结果。