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它的应用定性夹卐心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样◇品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原⊙结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中◥的其它成份。
然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二◢次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未①结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗╳体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒 的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是』初试阳性。
最新的美国RD、TSZ品牌猪ELISA试剂盒:
1 | 内皮素1 | 7 | 促生长激素释放激素 |
2 | 免疫球蛋白Ψ♂M(IgM) | 8 | 促卵泡素 |
3 | 免疫球蛋白G(IgG) | 9 | 表皮生长因子 |
4 | 巨噬细胞炎性蛋白∴1α | 10 | 猪白介素6(IL-6) |
5 | 基质金属蛋白酶抑制因子 | 11 | 白介素1(IL-1) |
6 | γ干扰素 | 12 | Ⅲ型前胶原肽 |
实验加样需避∏免问题:
一般有3次加样步聚:加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融【解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓※,避免气泡,可上下▽倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标↘本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血⌒ 清标本,然后在微型震荡器上震〗荡1分钟∑以保证混和。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。
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