本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T1μmol/L - 32μmol/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中一氧化氮合成酶(NOS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠【一氧化氮合成酶(NOS)水平。用纯化的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS)，再与HRP标记的一氧化氮合成酶(NOS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后□　加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用卐下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下◆测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（64μmol/L） 0.5ml×1瓶3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀█释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个标¤本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于『-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测∞含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。32μmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀♀释液16μmol/L 4号标准品 150μl的5号标」准品加入⌒150μl标准品稀释液8μmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品▼加入150μl标准品稀释液4μmol/L 2号标准品 150μl的3号标○准品加入150μl标准品稀释液2μmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试㊣　剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测←样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔︽中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品〖10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔△壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后¤置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉①封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试╳剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入☆显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终√止液50μl，终止反应（此时蓝◆色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。