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                第六届图▲书馆论坛580*60

                谷物淀粉含量的测定(旋光法)

                教育▲装备采购网 2014-04-01 09:48 围观423次

                实验试剂乙醚、氯化高汞、乙醇、醋酸-氯化钙、30%ZnSO4、15%K4Fe(CN)。

                实验设备离心机、天平、旋光仪、250ml三角瓶、漏斗、离心管、小电炉。

                实』验材料面粉

                实验步骤1. 样品准备

                1)称取样品:精确称取约2.5g样品细粉(要求含淀粉约2g),置于离心管内。

                2)脱脂:加乙醚数ml到离心管内,用细玻棒充分搅拌,然后离心。倾出上清液并收集以备回收乙醚。重复脱脂数次,以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在会使以后淀粉溶液的『过滤困难)。大多数谷物样¤品含脂肪较少,可免去这个脱脂手续。

                3)抑制酶活性:加含〒有氯化高汞的溶液10ml到离心管内,充分搅拌,然后离心,倾去上清∮液,得到残余物。

                4)脱糖:加80%乙醇10ml到离心管中,充分搅拌以洗涤残余物(每☆次都用同一玻棒),离心,倾去下清液。重复洗涤数次以去除可溶性糖分。

                2. 溶提淀粉

                1)加醋酸-氯化钙:先用醋酸氯化钙溶液约10ml加到离心管中,搅拌后全部〓倾入250ml三角瓶内,再用醋酸氯化◥钙溶液50ml分数次洗涤离心管,洗涤液并入三角瓶内,搅拌玻棒也转移到三※角瓶内。

                2)煮沸溶解:先用蜡笔标记液面高度,直接置于加有石棉网的小电炉上,在4min~5min内迅速煮沸,保持沸腾15min~17min,立即将三角瓶取下,置流水中冷却。煮沸过程↘中要时加搅拌,勿令烧焦;要调节温度,勿使泡Ψ 沫涌出瓶外;常用玻璃将瓶侧的细粒擦下;并加水保持液面高度。

                3. 沉淀杂↑质和定容:

                1)加沉淀剂:将三角瓶内的水解液转入100ml容量瓶,用醋酸氯化钙溶液充分洗涤三角瓶瓶,并入容量瓶内,加30%ZnSO41ml混合后,再加15%K4Fe(CN)61ml,用水稀释Ψ 至接近刻度时,加95%乙醇一滴以破坏泡沫,然后稀释到刻度〒,充分混合,静置,以使蛋白充分沉淀。

                2)滤清:用漏斗(加一层滤纸)过滤。先倾清溶液约10ml于此滤纸上,使其完全湿润▃,让溶液流干,弃去滤液,再倾清溶液进行过滤,用干燥的容器接受此滤⌒液,收集约50ml,即可供测定∏之用。

                4. 测定旋光度:用旋光测定管装满滤ξ液,小心地按照旋光仪使用说明,进行旋光度的测定。

                5. 结果计算

                淀粉(%)=α×N×100/{[α]20D×L×(W-K)}×100

                式中:α:用钠光时观测到的旋光度;[α]20 D:淀粉的比◆旋度,在这种方法条件下为203°;L:旋光管长度∑ (dm);W:样品质量(g);K:样品水分含量(g);N:稀释倍数;100:换算为百分率。也可以不用上列ζ 公式计算,改用工作曲线来求得淀粉含量,这样︻准确度高些。

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