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                人免疫球蛋白轻链kappa抗体ELISA试剂盒操作方法

                教育装备采购网 2014-03-26 08:39 围观274次
                使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白轻链kappa抗体(κ-IgLC)含量。操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液24pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液12pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液6pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待∩测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动▅混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除↘外。 7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加∞入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝〇色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使∏用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存Ψ。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确︽性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时♀做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔¤第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。
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