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                脂肪及结缔组织的染色方法

                教育装备ㄨ采购网 2014-03-11 13:50 围观441次

                  实验步骤1. 脂肪的苏丹Ⅲ(Ⅳ)染色方法:

                  1) 冰○冻切片用70%乙醇漂洗,不超过30s。

                  2) 切片入①苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液中3~15min或延长至1h。

                  3) 新50%~70%乙醇分化,直至洗去切片上的浮色为止,蒸馏水洗。

                  4) 用稀释1倍的明矾苏木精浅染核1min或稍长。

                  5) 用滤纸将切片及周围的水分吸干。

                  6) 用甘油或甘油明胶封固。

                  结果判定:脂肪呈桔黄色或桔红色,细胞核浅蓝色。

                  2. 结缔组织的常见染色方法

                  1) Mallory三色染色〗法:常用于判定多种组织、器官的病变程度及修复情况,区分肿瘤组织中的纤维成☆分与平滑肌。

                  染色步骤:

                  A. 中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。

                  B. 重卐铬酸钾液10min。

                  C. 蒸馏水冲【洗2min,蒸馏水2次。

                  D. 酸性复红液2min,蒸馏水稍洗。

                  E. 苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。

                  F. 直接用无水乙醇脱水,二甲苯透※明,中性树胶封固。

                  结果判定:胶原和网状纤维呈蓝色。

                  2) Van Gieson苦味酸酸■性复红法:可以显示组织、器官的损伤、修复及↘硬化情况,特别是用于鉴别肿瘤组织中的胶原纤维与平滑肌纤维,可为诊断提∏供重要依据。

                  染色步骤:

                  A. 组织切片按常规脱蜡水洗。

                  B. 用Weigert苏木素液染细胞核5~l0 min。

                  C. 自来水充分洗涤数分钟。

                  D. 用显微镜检查细胞核的着色程度,过深可用0.5%盐酸乙醇分化。

                  E. 自来水Ψ 洗至变蓝;用蒸馏水洗。

                  F. 用Van Gieson液染1~5 min。

                  G. 倾去染液,直接用95%乙醇分化和脱水。

                  H. 无水乙醇脱水,二甲◤苯透明,中性树胶封固。

                  结果判定:胶原纤维呈深粉红色▃,肌纤维、胞浆及红细胞黄色,细胞核呈棕黑色或兰黑色。

                  3) 网↓状纤维染色-Wider染色法:可以用来显示病变组织网状支架的破坏情况。特别是在肿瘤病理诊断中,网状纤维→染色对于鉴别来源于上皮组织和间叶组织的恶性肿瘤具有重要价值。

                  染色步骤:

                  A. 组织切片脱↑蜡至水。

                  B. 10%磷钼酸,2~5min。蒸馏水冲洗〓,5min。

                  C. 1%硝酸铀,5s。蒸馏水冲洗,10s。

                  D. 氧化银】溶液,5~10min。

                  E. 95%乙醇速洗,1~2s。

                  F. 还原液还原,1~2s。蒸馏水冲洗,2min。

                  G. 0.2%氯化金ζ 调色,2~20s。蒸馏水冲洗,5min。

                  H. 5%次亚硫酸钠,2min。蒸馏水冲洗,2min。

                  I. 核固红染细胞核,5~10min。水稍洗。

                  J. 常规无水乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。

                  结果判定:网状纤维呈黑色、细胞◇核呈红色。

                 

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