目的
使用沃特世(Waters )ACQUITYUPC2 系统成功将药典中蒽啉的正相HPLC含量测定方法转换为超临界流体◢色谱法。
背景
目前，美国药典(USP)对于药品蒽啉，(9(10H)-蒽酮，1,8-二羟基-9-蒽酮)[CAS#1143-38-0]的含量测定方法是正相HPLC方法。使用4.6x250mm硅胶柱(L3)进行╱等度分离，流动相为82:12:6的正己烷:二氯甲烷:冰醋酸混合洗脱液，流速2mL/min，如图1所示。目前测定方法的运行时间大约为10分钟(最后一个主峰出峰时间的2倍)。虽然该方法可行且可靠，但是，出于健康、安全、环境和成本等方面的考虑，很多⊙实验室都希望减少典型的正相色谱溶剂的使用(如正◎己烷和二氯甲烷)。超临界液体色谱(SFC)是一『种正相色谱分离技术，其使用CO2作为主流动相，通常会使
用极性溶剂(如甲醇)作为改性剂。由于SFC的原理与HPLC的≡原理相似，因此，目前的方法应该能够︾转换成SFC方法，从而减少溶剂的使用和处理，降低每次〓分析的成本，同时增强健康、安︽全和环境方面的保护。
成功地将美国药典中HPLC方法转换为高卐质量的UPC2 方法，每次分析的成本为.05(相▲比于药典的.90)，并且速度为药々典的1.6倍。
将这些方法转变为SFC方法必须保持分析数据的质量(保留时间的重现性、样∩品中目标化合物和其它组分之间的分▂离度)，并且必须得到◤与当前正相色谱方法一致的分析结果。
解决方案
制备蒽啉样品并使用目前的↑USP方法进行分析(该样品也用于UPC2分析)。分析结果与使用ACQUITY UPC2方法得到的结果进行对比△。超高效合相色谱(Ultra Performance Convergence Chromatography ，UPC2)方法的条件々如下：
主要系统适≡应性参数的对比见表1。在所有的分析条件中，由转换后的UPC2方法得到的结果很容易达到USP要求的系统适应性的值，且与正相色谱方法得到的值相比，结果很理想←。有趣的是，适应性混合物(蒽啉和丹☆蒽醌(danthron))选择性有所改变，但并不会对方法转换产生不良影响。两种方法测定未知纯度的蒽啉样品，分析结果【一致。使用正相HPLC分析时，蒽啉样品含量为94.3%;而使用UPC2时，含量为94.6%。
本例中，单次正相HPLC分析消耗16.4mL正己烷和1.2mL二氯甲烷。相比之下，UPC2方法◆仅消耗1.05mL甲醇。这说明了通过将正相色谱方法转№换为UPC2方法可以大大地减少有机溶液的使用。根据目前的溶液价格，单次正相HPLC分析成本大约为0.90美元，相比之下，UPC2仅为0.05美元。
总结
使用ACQUITY UPC2系统，可以成功地将美国药典的HPLC方法转换为UPC2方法。由这种↓新的UPC2方法得到的数据与目前的HPLC方法相当，甚至更好，速度是目前的⌒HPLC方法1.6倍，消耗的溶剂更少。我们以更快的速度得到高质量的分析数据时，实验室生产率提高，而每个√样本的分析成本降低。ACQUITY UPC2系统是实验室将目前的正相HPLC方法转换为更高√效、更省钱的UPC2的方法的一种理』想解决方案，同时也增强∏了健康、安全和环境方面的保护。
