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                扫描电镜实验报告及结果展示-上海郑核

                扫描电镜实验报告及结果展示-上海郑核
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                高教
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                详细说明

                扫描电镜实验报告及结果展示-上海郑核

                扫描电镜实验报告及结果展示-上海郑核

                  一、实验器材及试剂

                  1、实验器材

                  名称厂家型号

                  临界∏点干燥仪QuorumK850

                  离子溅射仪IXRFMSP-2S

                  扫描电子显微镜hitachiSU8010

                  2、主要实验试剂

                  试剂厂家货号

                  电镜固定液ServicebioG1102

                  无水乙醇国药集团化学试剂有限公司

                  PBSServicebioG0002

                  锇酸Ted Pella Inc

                  二、扫描电镜制样步骤

                  1、取材固定:新鲜组织确定取材部位,尽量减小牵拉、挫伤与挤压等机械损伤,1-3min内取样,组织块不超过3mm2,用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污,毛发等去掉,保护好需要扫描的面并做好标记(如在对面进行剪角处理)。迅速投入电镜固定液室温固定2h,再转移至4°保存。

                  贴壁细胞:贴壁于盖玻片的细胞培养处理完成后弃」培养基,用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温固定2h,再转移至4°保存。注意保护好扫描面避免剧烈震荡细胞脱落。

                  2、后固定:固定好的样品经0.1M磷酸缓冲液PB((PH7.4)漂洗3次,每次15min。1%的锇酸·0.1M磷酸缓冲液PB(PH7.4)室温(20℃)固定1-2h。0.1M磷酸缓冲液PB(PH7.4)漂洗3次,每次15min。

                  3、脱水:组织依次入30%-50%-70%-80%-90%-95%-100%-100%酒精每次15min。

                  4、干燥:将样本放入临界点干燥仪内进行干燥。

                  (无机材料不需要以上步骤)

                  5、样本导电处理:将样本紧贴于导电碳膜双面胶上放入离子溅射仪样品台上进行喷金30s左右。

                  6、扫描电子显微镜下观察采图。

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