MP Bio G418 geneticin遗传霉素
简单介绍：G418是一种对原核及真核细胞都具毒性的氨基糖苷类抗生素,它具有干扰蛋白合成的功能，可用来筛选表达G-418抗性基因(如:氨基糖苷3'磷酸转移酶ξ[APH 3'])的培养细胞, 在分子遗传试验中常被用作抗性筛选。它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因对原核和真核等细胞产生毒素,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞,也包括原〒生动物和蠕虫。当neo基因被整合进◇真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特》性 ,已在※基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应▅用。
G418 Sulfate（G418liu酸盐），也称作Geneticin（遗传霉素），是一种结构类似于庆大霉素B1（Gentamycin B1）的氨基糖苷类抗生素，通过影响80S核糖体功能和阻╱断延伸步骤来干扰蛋白合成，对原核和真核等细胞都有①毒性,包括细菌、酵母、高等植物和哺乳动物细胞,也包括原生→动物和蠕虫。其抗性基因（主要为neo基因）位』于转座子Tn601（903）或Tn5（来源于细菌），但是可以在真※核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞，使其获得对G418的耐药性，从而用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真∏核细胞。
MP Bio G418 geneticin遗传霉素
哺乳动物细胞¤中，当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后,使其编码表达氨基糖苷◤磷酸转移酶（amino-glycoside 3’-phosphotransferase，APH(3)II）。此◥酶通过共价修饰G418的氨基↓或羟基功能，抑制抗ω生素-核糖体间的相互作用，从而使得抗生素失活。这一特性№赋予细胞产生抗性。稳转细胞株筛选实验，需要建立杀灭曲【线（剂量反应曲线→）确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。
植物细胞中，通过转染↑携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨〖基糖苷磷酸转移酶，这个酶使得多种抗生『素丧失活性，包括G418，卡那霉素和巴龙霉素。
MP Bio G418 geneticin遗传霉素
使用方法
1.G418储存∑ 液的配制（50mg/ml，活性浓度）
根据此公式进行换算：（1000/A0）×A1=A2，其中A0是G418的活力值（Potency），因批⊙次而异。可见批□次对应的质检报告，或者瓶子上的标签。A1是想配制的活ㄨ性G418浓度。A2是实际称重的粉末与体积比浓度。
比如若所用批次的G418活力值为：750μg/mg，要配制50mg/ml的G418活性浓度，则实际要配制的♀粉末浓度为1000/750×50 mg/ml=66.33 mg/ml。
如果配制10ml的G418储存液（活性浓度，50 mg/ml），则需要称◣取663.3mg粉末。
根据上述换算得到ぷ的实际粉末称重量，加入10 ml无菌去离子水内使其完全溶解。
先用5ml无菌〗去离子水预湿润0.22μm针头式过滤器，除尽水。之后使用此√滤器过滤，除菌后分装成单次使用的小量（如1ml）放到-20℃冻存，1年稳定。
