仅供科研使用，采用酶联免疫竞争法定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中牛㊣ 黄体生成素（LH）的浓度。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝※剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。
样本保存和稳定性
样本在2-8℃条件下，可以储存72h，或者在- 20℃储存6个月。样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
操作程序
1. 将各种试剂移至室温平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后▽备用。
2. 将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品依次各设两3. 孔，每孔加入㊣相应校准品50μl；其余每个检测孔直接加质控品或待测血清50μl。
4. 每孔加入酶标抗原50μl（空△白对照孔除外），再按同样的顺序每孔加入抗体50μl，充分混匀，贴上封板膜，置37℃温育1小时。
5. 手工洗板：弃去孔内液体，洗⊙涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
6. 每孔加显∩色剂A液50μl，显色剂B液50μl，振¤荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
7.用酶标仪读数，单波长酶标仪需先用空白对照孔调零点，然后测定☆各孔吸光值。
【实验结果计算】
1、双波长酶标仪可以不设空白对照孔，也无需调零点。单波长酶标仪必须设空白对照孔，先用空白对照孔调零，然后测量。如没有调零≡，则各孔吸光值均需减去空白对照孔的吸光值。
2、计算百分结合率：用校准品或样品的OD值除以S0的OD值，为百分结合率。
3、手工作图：用百分结合率对√数（logit-ln）坐标纸，以校准品浓度为横轴，以对应的百分结合率为纵轴，画出平滑●直线，在曲线上按照待测血清百结合率找到浓度值。
4、计算机：由电脑计算出其浓度。
