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                核酸纯化磁珠

                核酸纯化磁珠
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                • 核酸纯化磁珠
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                详细说明

                核酸纯化磁珠

                试剂盒组成

                产品编号

                规格

                BMSX-5

                5 mL

                BMSX-50

                50 mL

                磁珠参数:

                此试剂盒所用磁珠为◣NGS核酸片段筛选专门开发的磁珠(货号:BMS1000-2)

                试剂盒储存条件及稳定性

                试剂盒内组分室温保存即可,在适合的储存条件下该试剂盒未开封使用有效期为2年。

                产品简介

                该试剂盒采用磁珠纯化方式,适用于高通量测序文库(NGS)构建中DNA片段大小快速分选和回收。DNA片段筛选试剂盒的结合缓冲液中含有超顺磁珠,根据磁珠悬浮液和样品的体积比可选择性结合DNA片段。经过磁性分离和乙醇清洗,低盐洗脱缓冲液或无核酸酶水洗脱的高◎纯度的DNA片段不含有核苷酸,引物,接头,酶和盐等污染物,可被直接用于下游应用,比如:酶切、测序、杂交、PCR反应等后续操作。可应用于手动或自动液体操作设备。

                产品优势

                1. 适合DNA的片段范围广:100 bp~50 kb;

                2. 回收率高:回收率◥高达80%以上;

                3. DNA纯度高:回收的PCR产物纯『度高;

                4. 操作快速简单:20 min即可完成整个操作流程,无需离心;

                5. 可适用于≡自动化、高通量PCR产物纯化。

                6. 该试剂盒使用步骤和国外beckman Ampure XP高度一致,直接替换

                7. 价格低,订货期短等明显优势。

                产品原理

                核酸纯化磁珠

                图1(核酸纯化试剂盒大致工作々原理)

                自备》仪器和试剂

                1.磁力架(建议使用0.2ml磁力架,货号:BMB16-0.2)。

                2.洗涤液:80%乙醇水溶液。

                3.洗脱液:Buffer EB(10mM Tris-HCl,pH 8.0);或者RNase-Free Water。

                操作步骤

                请参考Beckman Ampure XP产品,直接替换。

                性能实例:

                1.核酸片段筛选测试:

                测试目的:通过DNA片段筛选测试自主研发试↘剂盒与国外进口试剂盒性能差异

                1)测试平台:安捷伦2100生物分析仪

                2)实验方法:将大片段DNA打断后添加磁珠纯化试剂盒进行片段筛选,运用两步法对样品进行核酸片段筛选回收(第一步,1.2X。第二步,0.5X。)

                图2如下:

                核酸纯化磁珠

                图2,安捷伦2100生物分析仪片段选择对比测试结果:自∏主研发试剂盒与国际商品化品牌Ampure XP 试剂盒核酸片段回收对比(左图为Ampure XP品牌核酸纯化试剂盒安捷伦2100生物分析仪检测』回收核酸平均片段大小,平均片★段大小为265;右图为自主研发核酸纯化试剂盒利用安捷伦2100生物分析仪检测回收核酸平均片段大小,平均片段大小为265;)对比结果十分接近。

                2. DNA回〓收效率测试

                测试目的:检测对DNA片段的回收效率

                实验方案:大片段DNA打断后,经试剂盒一步法纯化后(1.8X)测试DNA回收效率

                表3如下:

                测试品牌

                DNA总投入量

                纯化后DNA回收效率(%)

                Ampure XP-1

                5ug

                84.20%

                Ampure XP-2

                5ug

                83.87%

                自主研发试剂盒-1

                5ug

                84.40%

                自主研发试剂盒-2

                5ug

                84.12%

                由表3可以看出,DNA回收效率测试结果相近,都达到80%以上。

                3.主流测序仪测序测试

                测试目的:通过市面上主流基因测序仪平台检验试剂盒稳▲定性

                1)测试平台:Proton测序平台

                2)实验步骤:生物样本提取出核酸后进行文库制备+上机测序

                3)核酸样品总数12个:6个对照品,6个测试品,其中文●库制备部分,分别采用本公司自主研发的纯化试剂盒和Ampure XP商品化试剂盒进行核酸纯化。

                表4如下:

                Proton 平台测试结果

                对照组(Ampure XP)

                测试组(自主研发)

                对比值

                唯一〓比对率

                5.17

                5.42

                0.25

                GC含量平均值

                41.14

                40.85

                - 0.29

                原始数据积累平均值

                6.88

                7.33

                0.45

                根据表4体现的Proton测序分析结果ξ 看,表4中的唯一比〒对率与原始数据积累平均值越高越好卐,GC含量平均值对照组与测试组均符合标准。经测试结果分析,自主研发核酸纯化试剂盒对比◇进口商品化试剂盒性能相差无异,能够有效的替代进口的磁珠纯化试剂盒。

                二氧化硅︼磁珠

                BioMag –羟基修饰磁珠

                核酸分析是分⌒子生物学,微生物学,临床检验,法医学等领域的重要分析手段,利用磁珠在一定条件下可以大↘量特异性吸附Ψ 核酸,而当条件改变时可以解吸附的原理,我们开发出磁响应迅速的硅羟基磁珠,以满足对核酸的快速分离纯化◆需要。提取到的⊙核酸可直接用于下游的核酸分析。

                应用方向

                1.从全血、组织、植物和微生物等样本中提取基因组DNA

                2.提取病毒DNA/RNA,总RNA

                3.纯化PCR产物

                4.提取质粒DNA

                5.核酸结合量:每mg 磁珠能从200μl全血中提取4-12μg基因组DNA

                6.推荐用量:1mg/次

                产品规格:

                活性基团

                -0H

                磁珠表层材】料

                超顺磁二氧化硅磁珠/亲▲水高分子磁珠

                粒径范围

                100nm/300nm//1μm/2.8μm/5μm

                包装

                2ml 20ml 200ml

                浓度

                50mg/ml (溶剂为0.05%叠氮的水溶液)

                批间差

                5%

                保存

                RT,禁止冷冻,使用∞前请充分混匀

                磁珠法提取核酸的反应原理图:

                核酸纯化磁珠

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