蜂蜜/蜂王浆是世界上公认的唯一可供人类直接服用的高活性成分的超级营养食品。 10- 羟基-2- 癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中特有的一种不饱和脂肪酸，由于这种酸在自然界的其它物质中没有，只存在于蜂王浆中，所以也称为王浆酸。分离出的纯王浆酸呈白色晶体，在新鲜的蜂王浆中多以游ζ离形式存在，性质比较稳定，具有很好的杀菌、抑菌、抗疲劳、抗衰老作用和抗癌、抗放射的功能，为此许多保健食品均添加有蜂王浆。因此作为评价蜂王浆及其制品质量优劣的主要指标之∴一的10-HDA 含量测定显得尤其重要。至今为止，10-HDA 含量测定有薄层扫卐描法、分光光度法、气相法、液相法，且多见于分析蜂王浆中的10-HDA 。薄层扫描法、分光光度法专属性和准确性较差，气相法处理繁琐，目前最为※通用的是H P L C法。液相法处◥理简单、结果准确，本公司基于以上情况，建立了超声提取、冷藏⊙沉淀后，用对羧基苯甲酸乙酯做内标，反相液相色谱法测定蜂王浆及其制品中1 0 -H D A 含量的方法，取得了令人满意的结果。

 

一、主要性能特点:   
1）、蜂蜜/蜂王浆中葵烯酸检测分析液相色谱仪LC-3000C整套系统由P3000高压输液泵（二元梯度）、UV3000分光检测器、分析型动态○高压混合器、进样阀、溶剂托盘、色谱柱、反控色谱工作站软件等组成；安装、调试及使用都非常简单。 
2）、P3000高压输液泵是以CPLD技术为核心，由单片机控制的高精密输液泵系统。全数字频率发生系统，先进的马达驱动系统友好■的人机显示◤界面使操作很方便，先进的泵头及单项阀设计思路，融汇了当今世界上最先进的经验，使该系统在各种条件下都能保证输液的精度及重复性。  

3）、UV3000是一种分光检测器，可以匹配任何输液泵，适用于化学分析、农药、制药、化工等领域有着广泛的应用。采用了全数字、高集成化设计理念，大大降低仪器的噪声；基于数字信号传输和处理，该检测器的信号可直接输入到计算机的串行口进行采集，完全甩掉了传统仪器必须使用的数据采集卡！
  

(1). 主要仪器配置：
1、LC-3000高效液相色谱仪；2、色谱柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5
3、高速＠离心机（大于4500r/min；50ml）4、超声∑　波震荡仪；5、涡旋混合器；
6、分析天平（万分之一）；7、溶剂过滤器（带0.45um有机、水系过滤膜和真空泵＠ ）；
（2）、主要试剂：

1.纯净水（二次蒸馏水） 2.甲醇：分析醇 3.乙醇：优级纯   4.内标物：对羟基苯甲酸甲酯含量99.0%   5.10-HAD标准品：99.0%以上。使用前应在放有浓硫酸的减压干燥器内减压干燥24h 6.10-HAD标准溶液：取干燥后的10-HAD标准品约25mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。7.盐酸（C=0.03mol/L）：量取0.1mol/L盐酸100ml，加入200ml重蒸馏水中。

（3）.色谱条件：
色谱柱为Kromasil C18 柱，流动相为V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2，流速1.0ml/min，对羧基苯甲酸乙酯作内标，检测波长210nm。本法简单、快速、准确，重现性好，回收率高(97.6%～101.8%)。

样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5g，置于已称定的50ml容量瓶中，精密称定，加0.03mol/L盐酸1ml和水2ml，置漩涡混合器上混合使样品溶解，加无水乙醇30ml，边加边轻轻摇动，再精密加入内标溶液10ml，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置超声波中超声15min，或置漩涡混合器上振荡15min，取出，在3000r/min下离心10min后测定。如不能及』时测定，应放置在冰箱中冷藏待测。