【生理学】
骨钙素，或骨γ-羧基谷氨酸蛋白(BGP)，是骨基质中主要的非胶原蛋白质。其分子量大约5800道尔顿，含有49个氨基酸，包括三个γ-羧基谷氨酸残基。
骨钙素由成骨细胞在骨中合成。合成后部分进入骨基质中，部分流入循环系统。骨钙素的明确生理作用仍不清楚。大量研究显示，骨钙素在循环系统中的水平可反映骨形成速率(1一14)。
已证明血清中骨钙素的测定有助于鉴别妇女发展为骨质疏松的危险，有助于监测绝经前和绝经后，以及抗骨吸收治疗中骨的代谢。
氨基端和中段骨钙素酶联免疫吸附分析试剂盒是基于运用两种高ω度特异的抗人骨钙素单克隆抗体（Mabs）。识别骨钙素中部(氨基酸20一29)的生物素标记抗体用于抗原抗体复合物的捕获，识别氨基端(氨基酸10一16)的过氧化物酶偶联抗ω 体用于检测。除完整骨钙素(氨基酸1一49)之外，氨基端-中部片段(氨基酸1一43)也 同时被检测。
标准品、质控品和待测样本◆加入链霉抗生物素蛋白(streptavidin)包被的微孔板中，然后加入生物素标记◎抗体和过氧化物酶偶联抗体的混合物。室温孵育2小时后清洗微孔板，加入生色底物，加入硫︾酸终止显色反应。最后测量吸光度。
【临床应用】
绝经后妇女骨质疏松：
监测抗骨吸收治疗的（如激素替代疗法（HRT)，双膦酸盐疗法）。
评估病人骨形成：
骨代谢疾病（如变形性骨炎）
【主要组成成份】
1.链霉抗生物素蛋白(Streptavidin) 包被的微孔板 (MTP)
链霉抗生物素蛋白预包被的条形微孔板 (12 条 x 8孔)，置于一塑△料框架中。
2.骨钙素标准A (瓶A)
一瓶含有蛋白质稳定剂和防★腐剂的PBS缓◣冲的冷冻干燥品。将标准A溶于 5.0 毫 升蒸馏水中。标准A用后必须存放于–18 °C以下。
3.骨钙素标准B一F (瓶B一瓶F)
五瓶含有合成人骨钙素、蛋白质稳定剂和防腐剂的PBS缓冲的冷冻干燥品。将各标准样本∩溶于0.5mL蒸馏水中。准确浓度标在各瓶上。 标准样本用后必须
存 放于–18°C以下，且只能冻融两次。
4.质控(瓶CO1—2)
两瓶含有合成人骨钙素、蛋白质稳定剂和防腐剂的PBS缓冲的冷冻干燥品。将质控样本溶于0.5mL蒸馏水中。质控品用后必须存放于–18°C以下，且只能冻融两次。请参考所附数据表中质控品的浓度范围。
5.过氧化物酶偶联抗体 (1号瓶)
一瓶(0.25mL)过氧化物酶偶联的鼠抗骨钙素氨基端特异性单克隆抗体浓缩液(溶于含蛋白质稳定剂，去污剂和防腐剂的TRIS缓冲液中)。使用㊣前加入10mL偶联稀释液(3号瓶)。
6.生物素标记抗体 (2号瓶)
一瓶(0.25mL)生物素标记的鼠抗骨钙素中部的特异性单克隆抗体浓缩液(溶于含蛋白质稳定剂，去污剂和防腐剂的TRIS缓冲液中)。使用前加入10mL偶联稀释液(3号瓶)。
7.偶联稀释液 (3号瓶)
一瓶( 至少22 mL)含有蛋白质稳定剂，去污剂和防腐剂的PBS缓冲溶液。
8.底物溶液 (瓶TMB)
一瓶( 至少12 mL)可直㊣ 接使用的四甲基联苯胺(TMB)底物(溶于酸性缓冲溶液№)。
请注意该生色底物可带浅蓝色。
9.终止液 (瓶ST)
一瓶( 至少12 mL)可直接使用的0.18mol/L硫酸溶液。
10.清洗溶液 (瓶W)
一瓶(至少20mL)含有去污剂和防腐剂的浓缩清洗缓冲液，用前以1体积浓缩清洗缓冲溶液+50体积蒸馏水的比例稀释。
11.封口膜
孵育时密封微孔板的粘性薄膜。
【储存条件及有效期】
收到氨基端和中段骨钙素酶联免疫吸附分析试剂盒后应在 2一8°C保存。试剂在此条件下稳定至包装盒上所标有效日期。
重新溶解后标准品和质控品应在–18°C以下存放，最长存放3 个月，且只能冻融两次。当抗体试剂混合后，剩余混合物应存放在2一8°C，存放应不超过1个月，或在–18°C 以下冻结。其它剩余试剂以及微孔板应在2一8°C保存。
【适用仪器】
适用于具有450nm、650nm波长的所有全自动、半自动酶标仪。
【样本要求】
静脉取血样，避免溶血。采样后 3 小时内分离血清。建议立即冷︾冻样本 (<–18°C )当分析血浆样本时，可使用肝素或EDTA抗凝的〇血浆。
【试剂盒特点】
易于操作
N-MID夹心酶联免疫分析试剂盒可识别完整的骨钙素和大的N-MID骨钙素片段。
在检测完整▂骨钙素方面，N-MID试剂盒比其他只能检测完整骨钙素的试剂盒具有更高的稳定性和可重现性。
高效的检测模式。
