[产品名称]
通用名称:直接抗人球蛋白试剂盒
英文名称:Direct Anti-human Globulin Reagents
[包装规格] wi 抗IgG,C3d(多特异性) 10ml/支，1支/盒
wi抗IgG 5ml/支，1支/盒
wi 抗C3d 5ml/支，1支/盒
[预期用途] 抗球蛋白试验（Coombs试验）是测定结合在红细胞上的抗体和/或补体的主要方法。直接Coombs试验是检测体内已被抗体和/或补体致敏的红细胞。间接Coombs试验通过血清与细胞的孵育，证实抗体和/或补体与红细胞在体外的结合。根据医疗器械体外诊断试ω剂注册分类，本试剂暂时只用于直接抗球蛋白试验。不同抗人球蛋白试剂的用途见表1。
表1 不同抗人球蛋白试剂的用途
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试 剂 用 途 |
wi抗IgG，C3d （多特异性） |
wi抗IgG |
wi抗C3 d |
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直接抗球蛋白试验 |
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自身免疫溶血性贫血的研究 |
是 |
是 |
是 |
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新生儿溶血病的研究 |
是 |
是 |
- |
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输血反应的研究 |
是 |
是 |
是 |
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药物致敏红细胞的研究 |
是 |
是 |
是 |
[检验原理] 抗体分子和补体成份都是球蛋白。用人球蛋白☉免疫动物使其产生抗体即抗人球蛋白。抗人球蛋白试剂可凝集被人球蛋白致敏的红细胞。抗人球蛋白试剂可以和致敏在红细胞上人球蛋白反应，通过桥梁作用使致敏红细胞出现凝集，呈现阳性反应。
试验过程↑中如果存在血清，其中的游离球蛋白极易中和抗人球蛋〇白试剂，使试验出现假阴性结果，因此红细胞必须经过充分洗涤。
[适用范围] 自身或同种免疫溶血性疾病的研究。
[主要组成成分] 直接抗人球蛋白试剂盒有三种规〖格,不同批号试剂盒中各组份可以互换：
wi抗IgG,C3d(多特异性) 10ml/支，1支/盒；
wi 抗IgG 5ml/支，1支/盒；
wi抗C3d 5ml/支，1支/盒；
试剂组成成分如下：
wi抗IgG,C3d(多特异性):高效价抗IgG,高效价抗C3d,氯化钠,磷酸二∑ 氢钾,磷酸氢二钠,稳定剂；
抗IgG:高效价抗IgG,氯化钠,磷酸二氢钾,磷酸氢二钠,稳定剂；
wi抗C3d:高效价抗C3d,丙种球蛋白（10%）,氯化钠,磷酸二氢钾,磷酸氢二钠,稳定剂。
[储存条件及有效期] 2-8℃保存，请勿反复冻融。
储存条件下有效期为24个月。
[样本要求]
应用EDTA抗凝标本，可反映体内红细胞☆被补体致敏的真实情况。若怀疑冷抗体引起的直接抗球蛋白试验阳性，其血液标本凝固应保持在37℃，直到血清被分离▼出来为止。
[检验方法]
1. 标本的收集：见[样本要求]
2. 直接抗球蛋白试验：
2.1 将1滴受检者3％红细胞悬液加入干净的小试管中（75×12mm），用盐水洗涤3次[以3400转/分(1000g)，离心1分钟]。每次〖洗涤后，将上清液全部倒出。
2.2 加入2滴抗IgG, C3d (多特异性)或抗IgG或抗C3d，以3400转/分(1000g)，离心15秒，用肉眼或借助光镜观察凝集，并按程度记录结果。
2.3 判断结果须持一定角度轻轻地摇动试管直到松动所有的细╲胞，然后反复倾斜试管，直到均匀的细胞悬液（阴性）或者凝集物（阳性）为止。
2.4 如阴性结果，在室温中放置5-10分钟，再离心一次，重读结果。这样做，阴性反应有时会变成阳性。
注意：仅对C3d和IgA致敏红细胞有增强作ぷ用，IgG致敏细胞反而会变弱（见注意事项）。
3. 阳性对照（IgG抗D致敏细胞）：
3.1 每批新的试剂，或在4℃保存时间过长，需做阳性对◥照试验，至少每【月一次。1滴阳性对照细胞加2滴直接抗人球蛋白√试剂，离心判定结果。
3.2 在试验中，于判为阴性的试管内加入1滴阳性对照细胞，再离心，然后重悬浮，判定结果。如果最初洗涤能充分除去所有未结合的球蛋白，结果为＠阳性。这是一个重要的对照，因为这是检测细胞是否洗涤充分的唯一方法。
3.3 阳性对照细胞（IgG抗D致敏细胞）制备： 1份市售抗D（IgG）试剂（效价≥1:8）＋1份Rh（D）阳性O型红■细胞混匀，370C水浴30分钟，用生理盐水三洗，配成3％红细胞悬液，当天使用。
[检验结果的解释]
阳性反应——出现红细胞凝集。表示红细胞上有相应抗体存在。
阴性反应——红细胞不凝集。表示红细胞没有相应抗体存在。
[检验方法的局限性]某些文献报告指出使⌒ 用抗IgG测定抗体偶尔会失败，可依靠含有抗C3成分的多价抗球蛋白试剂测定。没有被IgG 测得的抗体在某些病例中可能有临床意义。抗IgG可用在抗体筛选和相容性试验中，但必须认识到它的局限性。
[产品性能指标]
1.抗IgG
1.1外观：澄清透明，无杂质；
1.2灵敏度试验:分别与强抗体[抗D(IgG)]，中等强度抗体(抗Jka)和弱抗体(抗Fya)致敏细胞反应，结果均为阳性;
1.3效价: 与IgG (抗D)致◣敏细胞凝集效价≥1:4；
1.4 特异性试验：
1.4.1阴性对照试验：与加入AB血浆的Rh（D）阳性细胞反应，结果为阴性。
1.4.2阳性对¤照试验：与抗D(IgG)致敏细胞反应，结果为阳性。
2.抗C3d
2.1外观：澄清透明，无杂质；
2.2效价: 与C3致敏细胞凝集效价≥1:4；
2.3特异性试验
2.3.1阴性对照试验：与加入抗D（IgG）的Rh（D）阳性细胞反应，结果为阴性。
2.3.2阳性对照试验：与10%蔗糖溶液致敏细胞反应，结果均为阳性。
3.抗IgG，C3d
3.1外观：澄清透明，无杂质；
3.2灵敏度试验:分别与强抗体[抗D(IgG)]，中等强度抗体(抗Jka)和弱抗体(抗Fya)致敏细胞反应，结果均为阳性;
3.3效价: 与IgG (抗D)致敏细胞凝集效价≥1:4；
与C3致敏细胞凝集效价≥1:1；
3.4特异性试验
3.4.1阴性对照试验：与加入AB血浆的Rh（D）阳性细胞反应，结果为阴性。
3.4.2阳性对照试验：与抗D(IgG)致敏细胞反应，结果为阳性；
与10%蔗糖溶液致敏细胞反应，结果均为阳性。
[注意事项]
1.红细胞洗涤不充分，微量残留的未结合的球蛋白将要中和抗人球蛋白试剂。
2.直接抗球蛋白试验的试管在初读结果之后，再放在室温中5-10分钟。这样孵育之后，若细胞被C3d或IgA所致敏时，重新离心观察结果可使阴性试验转变为阳性结果。而IgG致敏的红细胞在孵育以后可能反应更弱。
3.试剂含有0.1%W/V叠氮钠。如果摄入会中毒。
4.本试剂仅用于体外诊断。
