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                人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒

                人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒
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                详细说明

                  人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒    

                  人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒原理的简要说⌒明书:sE-selectin (可溶性E选择素), 可溶性E-选择素分子是由内皮细胞分泌或膜表面E-选择素分子脱落形成。E-选择素由内皮细胞表达,以受体配体的方式发挥作用,参与体内炎症细胞的滚动、游走过程。受炎症、缺血再灌注后★氧自由基增多等多种刺激时,E-选择素分子开始脱落可致使血浆中可溶性粘附分子水平提高。  
                  人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒自备材料
                  1.蒸馏水。
                  2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
                  3.振荡器及磁力搅拌器等。   
                  标本要求 
                  1.标本采集后尽早ω 进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上◆进行试验,可将标本◎放于-20℃保存,但应避免反复冻融
                  2.不能︾检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
                  操作步骤
                  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
                  16μg/L    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释ㄨ液
                  8μg/L    4号标准品    150μl的5号标准△品加入150μl标准品稀释液
                  4μg/L    3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
                  2μg/L    2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
                  1μg/L    1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
                  2.加样:分◣别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
                  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
                  4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
                  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
                  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白㊣孔除外。 
                  7.温育:操作同3。
                  8.洗涤:操作同5。
                  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀№,37℃避光显色15分钟.
                  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
                  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 

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