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                TL植物光合热释光测量系统

                TL植物光合热释光测量系统
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                TL植物光合热释光测量系统

                TL植物光合热释光测量系统是研究光合作用的强有力的工具,是研究PSII电子传输的有效探针,广泛应用于除草剂对PSII的受体效应、QA与QB稳定性、光合放氧复合物(OEC)稳定性及PSII总体完整性等,还用于光合突变个体的筛选等。TL植物光合热释光测量系统

                TL植物光合热释光测量系统是针对研究PSII能量水平结构而设计的。PSII反应中心光诱导电荷分离导致储存了吸收光能的激发电子对的累积。加热诱导这些激发电子对的重组,从而引发光释放,并在一定温度范围内形成特异性热释光曲线。根据不同释光曲线的形状、峰位和峰值,可以研究分析关于特定激发电子对的能量稳☆定性及PSII反应中心功⊙能等。TL植物光合热释光测量系统的测量范围为-90°C到+190°C,使用范围更宽,可以对低温、高温段热释光进行研究。

                TL植物光合热释光测量系统

                应用领域

                1、  光合机理①研究——捕光色素复合体,PSII反应中心,放氧复合物研究;PSII能级分析;原初反应阶段的内在ㄨ过程探测

                2、  植物胁迫生理的早期检测与诊断

                3、  植物病虫害相关研究

                4、  除草剂影响

                5、  对植物光合研究的完善补充

                典型样品     

                植物碎片

                各种微藻

                叶绿体悬浮液

                类囊体♀悬浮液

                工作原理

                热释光(Thermoluminescence,缩写TL)是晶体受到辐射照射后,会产生自由电子◥,这些电子被晶格缺陷俘获而积攒起来,在加热过程中以光形式释放出来。其基本的实验过程是将叶片快速冷冻到某一温度,之后给叶片一个足够强,但时间尽量短(一般<5μs)的单翻转光(single turn-over ?ash),用于诱导每个PSII反映中心发生仅一次的电荷分离;然后逐渐升温,同时测量叶片放出的热释光,绘制TL谱带。

                TL植物光合热释光测量系统

                热释光研究中的一个主要工具是单次翻转光闪,要求足够强(光源强度高达 150 000 μmol(photons).m2.s1)和足够短(典型 < 5 微秒)来诱导每一个PSII反应中心发生一次,且仅一次的电荷分离。光闪的饱和效果¤可以通过QB段的强度来检查,它应该在首次光闪后达到最大,在2次光闪后不再增加。当前许多实验中使用的氙灯光闪具有明显缺陷——一个长的持续发光,或者“闪光拖尾”,这会在某些PSII反应中心中产生两次的电荷分离(连击)。虽然激光闪光能够有效降低连击,但不能消除。

                TL植物光合热释光测量系统使用能量足够强的LED光源,所释放5-10μs的方波脉冲能够饱和所有的PSII反应中心,其温度控制单元可以在降温后,再使样品的温度以0.1℃/sec到 2℃/sec的速ㄨ率线性增加。不同的闪光序列及样品处理能够使样品处于不同的能量状态,不同的温度下释放的光能源自光合机构的不同结构。分析释光曲线的形状、峰位和峰值,可以研究分析关于特定激发电子对的能量稳定性及PSII反应中心功能等。

                热释光与光合机构间关系

                TL植物光合热释光测量系统三种型号的控温方式与范围

                具体型号

                控温方式

                控温范围

                TL200/PMT标准版

                水冷单元——控温模块

                -25 ℃ 到+70℃

                TL300/HT高温版

                水冷单元——高温控制模块

                -25 ℃ 到+190 ℃

                TL400/LT液氮版

                水冷单元——液氮制冷单元——控温模块

                -90 ℃ 到+70 ℃

                系统组成

                TL系列植物光合热释光测量系统由3部分组成:多功能控↙制单元、温度调节器控制单元及测量室 。

                多功能控制单元(Multipurpose Control Unit根据用户定义方案或热发光向导提供的实验程序来执行实验过程,有两个输入频道,一个用于测量热发光信号(TL信号),另一个用于测量温度。 测量曲线以两种格式显示:时间/温度和时间/TL信号,或温度/TL信号。

                温度调节器控制单元(Thermoregulator Control Unit可以在-90°C 到 +190°C范围内以0.1°C的精确度控制样品的温度。 系统前面板可以显示实际的温度,温度调节可以通过手动或程序控制(软件)来实现。有两种工作模式:恒温模式和温度梯度模式,在恒温模式下仪器将维持样品在恒定的温度,而在温度梯度模式下,可以使样品的温度以0.1°C/sec到 2°C/sec的速率线性变化。

                AC-88水冷单元可将系统温度降低到4°C,包含一个电子控制的抽水泵和内部可以储水的制冷器,用于降低测量室的环境温度。

                CryoFab液氮罐(仅TL400/LT液氮版配备)通过管路连接到测量室,通过电子控制的低温输出阀╲可以将系统温度控制在 -20°C到 -90°C。

                由TFPE单元控制的辅助加热模块可以将系统温度加热到+190°C。

                测量室(Measuring Chamber包括四个关键组成部分:光源、光电倍增器、A/D 转换器、具有温度控制器的样品盘:

                1.         光源由8个超︼亮的发光二极管(λmax=630 nm)组成,发射的光闪强度高达150,000 μmol(photons). m2.s1以上,光闪持续时间最长为150 μs(典型5-10us),光强和光闪持续时间通过软件控制。

                2.         光电倍增器可以探测从300到900nm范围的光量子,从而测量热发光信号和缓发荧光。光电倍增器包括自己的电源。

                3.         A/D转换器用于光电倍增器的电流放大、软件控制增益和数字化,放大器的时间反应固定在50ms,以确定最小取样周期到100ms。

                TL植物光合热释光测量系统

                技术参数

                ·         温度范围:

                TL200/PMT标准版:-25 ℃ 到+70℃

                TL 300/HT高温版:-25 ℃ 到+190 ℃

                TL 400/LT液氮版:-90 ℃ 到+70 ℃

                ·         控温模式:恒温;线性变化(0.1oC/sec - 2oC/sec)

                ·         过热保护:提供
                环境光保护:提供

                ·         控制模式:手动(恒温);程序设定温度曲线

                ·         样品盘:直径?英※寸镀金铜盘

                ·         测量样品:藻类、蓝细菌、叶绿体悬浮液,叶片碎片等

                ·         光源:波长lmax=625nm,光源强度高达 150 000 μmol(photons). m2.s1以上

                ·         探测系统:传感器为可以通过软件灵敏控制的光电倍增器,光谱响应为300nm-900nm,最小取样周期100ms,时间响应50ms,接通延迟100ms

                ·         控制:用户可通过专用语言自定义程序控制卐仪器测量过程

                ·         通讯:USB

                ·         软件:FluorWin 3.6

                ·         电源:90V-240V

                操作软件与实验结果

                TL植物光合热释光测量系统TL植物光合热释光测量系统 

                典型应用

                TL植物光合热释光测量系统

                上图为源自拟南芥未冷冻叶片的热释光(M.Roman ,1998)。实心符号:对照(a);空心符号:轻度脱水(b)。单闪(细线)产生75%的S2和25%的S1(只有S2和S3产生热释光,S1无),双闪(粗线)25%的S2和75%的S3,3闪(点线)25%的S3。a、对照植物。单闪后,热释光B段与S2QB-相一致(B2,见表1)且可以被单因子拟合得很好。2次闪光后,则需要3个因子,S2QB-(B1),S3QB-(B2)和一个剩余因子(未显示)。b、适度脱水的植物。B段下调,S3比S2在更大程度上表明了类囊体腔内一个暗稳态的酸性pH。45摄氏度段(余辉)源自S2/3QB中心中热诱导的从基质还原剂向QB的电子传递,使它们发光:它的增加表明了一个强的同化势能NADP+ATP(Ducruet 2003)。

                产地:欧洲

                参考文献:

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