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                哺乳动物细胞冻存液

                哺乳动物细胞冻存液
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                详细说明

                哺乳动物细胞冻存液

                使用方法
                1. 用37℃水浴解冻细胞冻存液,并上下振荡数次混匀。
                备注:为了尽量减少污染,未使用完的细胞冻存液最好冻回-20℃,反复冻融不影响使
                用效果。
                2. 用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞,并用细胞计数器或血球计数板计数细
                胞浓度。
                备注:悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数,不易消化成单细胞的各种293细胞等最
                好使用含有EDTA的胰酶进行消化。
                3. 用低速离心沉淀细胞,弃去上清。
                备注:通常2000~3000rpm离心5~10min即可。
                4. 用适量细胞冻存液重悬细胞。
                备注:细胞浓度可根据情况调整为1~5×106/ml,通常为3×106/ml左右。
                5. 按每管1ml分装到细胞冻存管中。
                6. 直接放入-70℃冰箱中冻存。
                备注:无需程序降温盒或从4℃到-20℃到-70℃冰箱的繁琐程序降温。
                7. 24小时后转入液氮中冻存。
                备注:对于不同细胞,使用本细胞冻存液也可在-70℃冰箱中保存数周甚至数月,但建
                议最好尽快转入液氮中保存。
                8. 复苏方法同常规细胞冻存液。
                备注:对于大多数对DMSO不敏感的细胞,复苏时甚至传代前无需◥去除细胞冻存液,
                实际上本细胞冻存液中某些成分具有一定的促细胞生长特性。

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