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HBsAb人抗乙型肝炎病毒表面抗体ELISA试剂盒Human anti-hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA试剂盒ELISA法的HIV诊断试剂,生产工艺的优化和质量控制
采用ELISA法的HIV诊断试剂主要包括三类:HIV抗体检测试剂、HIV-1 p24抗原检测试剂以及抗RTV抗体检测试剂。根据试剂所用抗原的来源、检测的靶标记物以及试剂的检测原理,HIV抗体诊断试剂可分为四代产品:第一代HIV抗体诊♂断试剂于1985年问世,主要是采用天然的△HIV全病毒抗原进行包被,采用免疫荧光素和酶标记的抗人IgG抗体,检测抗HIV IgG抗体;第二代试剂主要使用基因工程重组和(或)人工合成肽作为抗原,采用间接法的原理检测抗HIV IgG抗体;第三代试剂⊙主要使用基因工程重组抗原,采用双抗原夹心法的原理检测←抗HIV的总抗体(Thorstensson et a1.,1998;Beelaert et aL,2002;Wang et a1.,2006);第四代试剂是第三代HIV抗体试剂和HIV-1 p24抗原检测试剂的结合,使用HIV抗原和抗HIV-1 p24抗体同时包被载〗体,加入待检血清进行孵育,最后加入酶标记的HIV抗原和抗HIV-1 p24抗体,司同时检测血清中№的HIV-1 p24抗原和抗HIV抗体(geom et a1.,2006;Speers et a1.,2005)。目前,市面上HIV抗体诊断试剂(ELISA法)主要包括第三代和第四代HIV抗体诊断试剂。抗R7V抗体检测试剂包被的@ 是一种被称为R7V的寡肽(RTPKIQV),其检测的靶物质为抗R7V抗体,该抗体可以中和HIV-1的原始病毒株和实验室适应株,而且,该抗体可以作为HIV感染者疾病进展■的一个标记(Galea et a1.,1998;Haslin et a1.,2002;Sanchez et a1.,2008)。上述试剂的主要原材料或生产过程涉及的生物▽学材料、生物学技术(如采用杂交瘤技术生产单抗,采用基因重组技术生产抗原)等具有较大的变异性,与其相关︻的生产过程也具有内在的变异性,所以仅采用对终产品进行质量控制的方法尚不能控制产品的质量,需要对其生产工艺进行优化和质量控制,以有效地保证体外诊断试剂产品在临床使用过程中质量的稳定性。
生产工艺的优化和质量控制,一般主要包括以下6个方面:
1)酶标板的选择;
2)包被物和酶标记物的制备;
3)各种缓冲液的制备;
4)酶标板的包被;
5)试剂反应条件的初步确定;
6)试剂的优化。
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