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                人IL-1 b 酶联免疫试█剂盒

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                    ELISA酶♀联免疫试剂盒特异性好,灵敏度高。

                    它的方法类型和操作步骤如下:ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的■抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状ω以及检测的具备条╳件,可设计出各种不同类型的检测方法。

                    (一)双抗体夹√心法

                     双抗体夹∞心法:是检测抗原最常♀用的方法,操作步骤如下:

                    (1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相◆抗体:洗涤除去★未结合的抗体及杂质。

                    (2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本■中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗¤原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

                    (3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标≡抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

                    (4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底∑ 物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗█原的定性或定量。

                    根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原⊙结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。

                    (二)双位点一步法

                    在双@抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克←隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体@ 的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体ぷ,测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。

                    在一步法测定中,应注意钩状√效应(hookeffect),类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时,过量抗原分〇别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实★际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。

                   (三)间接法测抗体

                    间接法是检▃测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称〗为间接法。操作步骤如下:

                    (1)将特异性抗㊣原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。

                    (2)加稀释的受检血清△:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血『清中的杂质由于不能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。

                    (3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,从而使该︼抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体,可用◥酶标羊抗人IgG抗体。

                     每个试剂盒操@ 作是不同的,请按说明书操作。具体事项请来电◥咨询!

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