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实验室代做实验项目
一、分子◎生物学检测服务
1、 引物设计合成(人、大鼠、小鼠、兔等)
2、 基因表达水平检测、内参检测
3、 SNP检测服务
4、 甲基化检测服务
5、 测序技术服『务
6、 芯片检测(全基因、MicroRNA)
7、 染色体分析
二、病理形态学检测
1、 HE、特殊染色(PAS、MASSON等)
2、 电镜(透射、扫描、免疫透射等)
3、 免疫组化(阳性表达部位、阳性面积、阳性细∑ 胞计数、微血管密度、
淋巴管密度、光密度等)
4、 TUNEL研究细胞凋亡,常规病理细胞形々态分析
5、 组织芯片
6、 原位杂交(DNA、RNA、MicroRNA等)
三、蛋白质①技术服务
1、 免疫印迹(Western-blotting)分析
2、 蛋白质组学
3、 凝胶迁滞实验(EMSA)分析DNA或RNA结合蛋白
四、免疫学检测服务
1、 酶联免疫(ELISA)技术
2、 放射免疫(RIA)
3、 化学发光
4、 常规生化█检测
五、代谢组学
GC-MS、LC-MS、NMR
实验标本收集及保存方法:
1:病理标本收集◣及保存:
1)冰冻切片:取下适当的组◣织块放于液氮保存;
2)石蜡切片:取下适当的组织块放于4%多聚甲醛保存;
3)细胞爬片:细胞爬片4%多聚甲醛固定30min,换PBS浸没4℃保存。
2:分子生物≡学标本收集及保存:
1)新鲜组织:切割标本╱后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)石蜡标本:常温保存;
3)全血标本:取适量〇全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
4)体液标本:高速离心取沉淀;
5)细胞标本:细胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
3:蛋白质实验标本收集及保▆存:
1)新鲜组织:切割标本◤后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)全血标本:取■适量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
3)细胞标本:细胞加细胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
4:ELISA、放免、生化实验标本收集及保存:
1)血清(血浆)样本:取全血加入促凝管(抗凝管),2500转离心20分钟左右,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存;
2)尿液样本:样本2500转离心20分钟左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液参照此实〗行;
3)细胞样本:检测分泌性的成份时,样本2500转离心20分钟左右,液氮或者-80℃冰箱保存;检测细胞内的成份时,用PBS稀释细胞悬液,通过反复冻融,以使细胞破坏并放╳出细胞内成份,2500转离心20分钟左右,收集上清同上;
4)组织样本:切割标本后,称取重量,用液氮♀或者-80℃冰箱冷冻保存备用。
5:代谢组学标本收集:
1)尿液样本:样本2500转离心20分钟左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液等参照此实行;
2)组织样本切割标本后,称取重量,用液氮△或者-80℃冰箱冷冻保存备用;
免疫学技术服务
酶联免疫(ELISA)技术服务
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用★于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质ω 的测定方法。这一方『法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保∮留酶的活性。在测定时,把受检标ぷ本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起▃反应。用洗涤的方法使固相载体上≡形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量〓与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质々的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊←物定性或定量≡分析。由于酶的催◤化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
放射免疫(RIA)技术服务
放射免疫分析(RIA)是以放←射性核素作示踪剂的标记免疫分析方☉法,它具有的高度灵敏性、特异性和精确性等特点,特别适用于激素、多肽等含量微少物质的超微量分析。如:肿瘤类;心血管,肾病,内分泌类;多肽因子类;脑-肠肽类;胃肠病,骨代谢类;甲状〒腺功能类;糖尿病类;性腺类等。
检测价格:1)血清:30元/样本/指标;2)尿液:40元/样本/指标
试剂盒价格另计,由本中心购买可享受一定的优惠,提供实验操作步骤,分析数据。
普通生化及荧光分光光度计检测
根据@ 反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其吸光度大小,对物质进行定量分析□ 的方法。对一卐般化学反应来说,反应完全(或正、逆反应动态平衡)、反应产物稳定时为反应终点。对抗原一抗体反应来说,是抗原和抗体完全反应、形成最大且稳定的免疫复合物时为终点。常用的●检测如:血常规、氧化应激、肝肾功能、离子检测等。
检测价格:15元/样本/指标,试剂盒价格另计;提供操作步骤,分析数据。
实时荧光↘定量PCR(RealTime PCR)技术服务
实时荧★光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量√PCR避免Ψ 了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达→量的变化;比▃较不同组织的 mRNA表达差异;验证基♀因芯片,siRNA干扰的实验结果等。
SYBR Green荧光染料法
SYBR Green是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它Ψ不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光▲。它的最大优点就是可以≡与任意引物、模板相配合,用于任意反应体系中。从经济角度考虑,它也比其它的探针的⊙价格要便宜得多。但由于它㊣能与所有的双链DNA结合,所以一旦反应体系中出现非特异扩增,那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素,可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特「异性影响。
TaqMan荧光探◇针法
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特№异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针ξ 完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭⊙基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一♀条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积◆与PCR产物形成完全同♂步。
Western Blotting技术服务
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫◣测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分》析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种◆蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于▃定性和定量分析。这一≡技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
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