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产品型号：YF1011 (48T/96T)

所在地区：上海

详细说明

Frizzled-1 Elisa试剂盒

ELISA试剂盒 规格： 48T/96T

上海逸峰生物试剂有限公司提供各种种属、各种系列ELISA检测试剂盒，仅适用于科研，不适用于临床诊断。公司提供免费代测，更好的为您服务。

Elisa试剂盒说明：

1．检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法

2．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

3．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

4．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

5．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为∮正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

Elisa试剂盒组成：

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1个	1个
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
标准品：90μg/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶标试剂	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
样品稀释液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体↓工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后15分钟以内进行检测。

注：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此Ψ 孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算

以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用▅标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代⊙入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓①度。

上海逸峰生物试剂有限公司长期提供各种系列酶免Elisa试剂盒、ELISA检测试剂盒，仅适用于科研，不适用于临床诊断。公司提供免费代测，

公司部分产品展示：

CD蛋白(损坏性关节炎)YKL-40 ELISA试剂盒

尿肌酸酐(Creatinine) ELISA试剂盒

25-羟基维他命D(25-OH-Vit D) ELISA试剂盒

吡啶啉/脱氧吡啶啉(PYD/DPD) ELISA试剂盒

白细胞三烯（C4/D4/E4） ELISA试剂盒

前列腺素D2-MOX ELISA试剂盒

二环－前列腺素E2 ELISA试剂盒

11b－前列腺素F2a ELISA试剂盒

CD蛋白(损坏性关节炎)YKL-40 ELISA试剂盒

尿肌酸酐(Creatinine) ELISA试剂盒

一分彩

Frizzled-1 Elisa试剂盒