总GLP-1酶免试剂盒
【预期用途】
该高灵敏度ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是专门用来定量检测血浆样本中的胰高血糖素样肽-1(7-36)[GLP-1(1-36)]和(9-36)[GLP-1(9-36)]的总浓度。哺乳动物的GLP-1肽链的基本氨基酸序列完全相同,如:小鼠、大鼠、猪、狗、猴、人等。该♀试剂盒仅适用于科学研究。
【实验原理】
该ELISA的设计,研发和生产的目的是对血清样品中的活性GLP-1(7-36)和GLP-1(9-36)进行定量检测Ψ。它是基于运用两个GLP-1特异性抗体与两个位点结合的“双位点夹㊣ 心”技术。
将标准品、质控品、和待测样品加入链霉亲和素包▓被的微孔板中。随后,将生物素偶联的GLP-1特异抗★体和HRP标记的GLP-1特异抗☆体混合物添加△到各个孔中。经过第一个保温孵育期,形成了“链霉亲和素-生物〓素抗体- GLP-1(7-36)/(9-36)-HRP标记抗体”的“双位点夹心”结构,该复合体被微孔板的内壁吸附住。游离的HRP标记抗体和缓冲基质则在洗涤过程中被冲走。微孔板加入过氧化物酶基质(3,3,5,5-四甲基联苯胺,TMB)并经过一段时间的反应后,然后用酶标仪测量吸光度。微孔板内壁的免疫复合体与GLP-1(7-36)/(9-36)的连接酶活性与样本中的总GLP-1数量成正比。
【组成成分】
链霉亲和素包被的微孔板:1块×96个
总GLP-1示踪抗体:1瓶×0.6mL
GLP-1(7-36)捕捉抗体:1瓶×0.6mL
ELISA浓缩洗涤液,30X:1瓶×20mL
ELISA HRP基质:1瓶×24mL
ELISA终止液:1瓶×12mL
总GLP-1标准品:5瓶
GLP-1质控品:2瓶
示踪抗体稀释液:1瓶×12mL
【简要实验步骤】
在各指定孔中分别添加100μL标准品、质控品和↑病人样本;
在各」孔中添加100μL抗体混合物;
2-8℃静置培养20-24小时;
用洗涤缓冲液稀释液洗净条带;
在各孔中添加200 μL的TMB基质;
室温下静置20分钟;
添加50 μL终止液;
读取450nm/620nm和450nm/650nm下的吸光度。