试验原理:
白介素2(Human IL-2)试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知白介素2(Human IL-2)浓度的标准品、未知浓度的★样品加入微孔酶标板内进行检测。先将白介素2(Human IL-2)和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再◢经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中白介素2(Human IL-2)的浓度呈比例关系。
操作注意事项
1.? 试剂应按标签▓说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.? 实验中不用的板条※应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.? 不用的其它试剂☉应包装好或盖好。不同▅批号的试剂不要混用。保质Ψ前使用。
4.? 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取①终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.? 使用干净的塑料容器配ω 置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.? 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸◣直接放入酶标反应孔中吸水。
7.? 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取∏OD值。
8.? 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.? 按照说明书中标明的时间▆、加液的量及顺序进行温育操作。
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样品收集、处理及保存△方法
1、? 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集№血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、? 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血【浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、? 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、? 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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