摘要：本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种分子标记猪瘟病毒弱毒疫苗的构建方法。本发明以含有猪瘟病毒疫苗C株基因组5’半长的重组质粒pA?F123和含有BVDV?VEDEVAC株Erns基因的重组质粒pE?B?Erns为模板，在两端设计20bp同源片段，使用一步定向克隆试剂盒，获得重组pA?B?Erns?F123质粒；用BamH?I和Sal?I将含有猪瘟病毒疫苗C株基因组3’半长的F456片段从重组质粒pB?F456中切下，克隆于相同酶作用的pA?B?Erns?F123中，获得重组质粒pA?B?Erns?FL。本发明的反向遗传操作技术的建立为研究CSFV基因功能和新型疫苗开辟了新的途径。利用反向〓遗传操作技术将外源标签插入病毒基因组可以用来研究病毒的复制、病毒编码蛋白的功能及抗病毒药物的筛选，使用RNA聚合酶Ⅱ系统能够高效和稳定地拯救猪瘟病毒感染性cDNA克隆。
- 专利类型发明专利
- 申请人浙江大学;
- 发明人方维焕;廖迅;李肖梁;
- 地址310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
- 申请号CN201610224932.3
- 申请时间2016年04月12日
- 申请公布号CN105886531A
- 申请公布时间2016年08月24日
- 分类号C12N15/85(2006.01)I;C12N15/40(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K39/187(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;
