1.RNA在细胞内极易降解，样本选择时一定要选取新鲜的样本组织◣或者取样后迅速低温处理（液氮速冻）；样本出现多次反复冻融后，RNA得率会严重下降，也会导致RNA降解；RNA提取环境要保持无RNA酶污染；

　　2.RNA容易受到环境污染导致RNA严重降解，建议实验过程中注意更换实验手套，使用所有耗材应该均无RNA酶的一次性耗材；

　　3.试剂盒中BufferEB（RNA专用）中含有少量EDTA，可能影响下游实验，使用时适当稀释，如果用其他洗脱液洗脱，要确保PH>7.5，PH过低影响洗脱效率；

　　4.离心柱漂洗完成后，尽可能烘干柱膜上残留乙醇，残留乙醇会影响洗脱效率和下游实验效果；柱膜也不建议过度干燥，没有乙醇☆味道残留最好，如果过度干燥可能影响RNA溶解；如果A260/230值过低，说明样本提取过程中漂洗不彻底，有盐离子残留，建议增加漂洗次数；

　　5.对于RNA提取，A260/280<1.9说明有可能存在DNA污染或者蛋白污染，如果洗脱↙样本时没有使用BufferEB，而使用ddH20（确保无RNA酶），比值或偏低，因为Ph值会影响吸光值，并不表示样本纯度低；

　　6.如果提取的样本RNA发生严重降解⌒，可能是由于裂解液没能完全灭活样本中RNA酶，建议增加裂解液使用量（具体参见说明书）或者降低样本初始量；

　　7.RNA完整性可以通过超微量核酸检测仪检测或者琼脂糖凝胶电泳（电泳条件：胶浓度1%；1XTAE电泳缓㊣　冲液）来判断；一般样本RNA电泳条带为两条带，对于植物样本，有可能存在叶绿体RNA干扰，条带数量大于4条，并不表示RNA提取发生降解；

　　8.电泳环境★受到RNA酶污染，也会造成RNA降解，电泳检测不准确，确保电泳过程中电泳缓冲＠液，上样缓冲△液无RNA酶污染；

　　9.RNA提取一般是传统TRIzol方法和改进的柱式方法；对于TRIzol法进本可以提取大部分样本RNA，但是对于多糖多酚植物样本，建议使用〓者尽量选择具有针对性的试剂盒（参见目录），传统TRIzol法无法有效去除多糖多酚这些＠ 次生代谢物；

　　10.对于植物样本，样本处理量无法统一确定，对于一般样本（烟草，拟南芥等），提取量不超过100mg鲜重组织或者20mg干重组织，对于复杂样本（水稻，玉米，榆树等），建议初始样本量不超过50mg鲜重或者10mg干重组织；如果需要较高的RNA量，可以采取多管浓缩的方法提取RNA;

　　11.对于植物样本，如果离心时堵塞离心柱，建议减少初始样本量；

　　12.对于血液样本，如果样本中含有血块，说明样本收集时未加入血液抗凝剂；建议重新收集样本并加入EDTA，肝素，柠檬酸等抗凝剂；

　　13.RNA浓度及纯度判断：[RNA]μg/ml=A260 x稀释倍数x40.0 （40.0：RNA的平均吸▓收系数）；

　　14.参考电泳图：（电泳图来源：使用者使用本公司SN0306AD提取梨果肉RNA电泳图）