凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法，故被称为凯氏定氮仪，又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。这种方法是由凯耶达尔在1883年发明的。
将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提中间产物的沸点。样本的分析过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明(开始时很暗)
原理
在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏。这步会将铵盐转化成氨。而总氨量(由样本的含氮量直接︻决定)会由反滴定法确定:冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反⌒ 应，而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠。滴定所得的结果↓乘以定的转换因子就可以得到结果。
使用步骤
消化
1、准备6个凯氏烧瓶，标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的▓蛋白溶液1.0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶☆颈上。再依次加□ 入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸2.0mL，30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作■为空白对照，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质，对样品√测定行校正。4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1.0mL代替样液，其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上，接好抽气装置。用微火加热煮沸，此时烧瓶内物质炭化变黑，并产生大量泡沫，务必注意防止气泡冲出管口。待泡沫消失停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至溶液●澄清后，再继续加热使消化液微沸15min。在消化过程〗中要随时转动烧瓶，以使内壁粘着物质均能流入底部，以◥保证样品全消化。消化时放出的气体内含SO2，具有强烈刺激性，因此自始自终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出。整个消化过程均应在通风橱中行。消化全后，关闭火焰，使烧瓶冷却至室温。
蒸馏吸收
蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内行的。凯氏定氮蒸馏装置种类甚多，大体上都由蒸气发生♂、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成。
1、仪器的洗涤
仪器安装前，各部件需经般方法洗涤干净，所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中，煮约10min，水洗、水煮10min，再水洗数次，然后安装并固定在只铁架台上。仪器使用前，微量全部管道都须经水蒸气洗涤，以除去管道内可能残留的氨，正在使用的仪器，每次测①样前，蒸气洗涤5min即可。较长时间未使用的仪器，重复蒸气洗涤，不得少于▂三次，并检查仪器是否正常。仔细检查各个ㄨ连接处，保证不漏气。 在蒸气发生器中加约2/3体积蒸馏水，加入数滴硫酸使其保持酸性，以避免水中的氨被蒸出而影响结果，并放入少许沸石(或毛细管▓等)，以防爆沸。沿小玻杯壁加入蒸馏水约20mL让水经插管流】入反应室，但玻杯内的水不要放光，塞上棒♂状玻塞，保持水封，防止漏气。蒸气发生后，立即关闭废液排放管上的开关，使蒸气只能入反应室，导致反应室内的水迅速沸腾，蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球入冷凝管冷却，在冷凝管下端放置个锥形瓶接收冷凝水。从定氮球发烫开始计时，连续蒸煮5min，然后『移开煤气灯。冲洗毕，夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管，由于气体冷却↘压力降低，反应室内废液自动抽到反应室外壳中，打开废液排出口夹子放出废液。如此清洗2~3次，再在冷凝管◥下换放个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶使冷凝管下口全浸⊙没在溶液中，蒸馏1~2min，观察锥形瓶内的溶液是否变色。如不变色，表示蒸馏装置内部已洗干净。移去锥形瓶，再蒸馏1~2min，用蒸馏水冲洗冷凝器下口，关闭煤气灯，仪器即㊣可供测样品使用。
2、无机氮标准样品的蒸馏吸收
由于定♀氮操作繁琐，为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术，初学者宜用无机氮标准样品行反〗复练习，再行有机氮未知样品的测定。常用巳知浓度的标准硫酸铵测试三次。 取洁净的100mL锥形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL，次甲基蓝-甲基红混合指示剂(呈紫红色)3~4滴，盖好瓶口待用。取其中只锥形瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸没在溶液中。注意:在此操作之前必须打开收集器活塞，以免锥形瓶内液体倒□吸。准确吸取2mL硫酸铵标准液加到玻杯中，小心提起棒状玻塞使々硫酸铵溶液慢慢流←入蒸馏瓶中，用少量蒸馏水冲洗小玻杯3次，并放人蒸馏瓶中︻。然后用量筒向小玻杯中加入10 mL 30%NaOH溶液，使碱液慢慢流入蒸馏瓶中，在碱液尚未全流入时，将棒状玻塞盖紧。向小玻杯中加约5mL蒸馏水，再慢慢打开玻塞，使半水流入蒸馏瓶，半留在小玻杯中作水↑封。关闭收集器活塞，加热蒸气发生器，行蒸馏。锥形瓶中∮的硼酸-指示剂混合液由于吸收了氨，由紫红色变■成绿色。自变色时起，再蒸馏3~5min，移动锥形瓶使瓶内液面离开冷凝管下口约lcm，并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口，再继续蒸馏1min，移开锥形瓶，盖好，准备滴定。 在次蒸馏毕后，移去煤气灯，夹紧蒸气发生器与◣收集器间的橡胶管，排除反应毕的废液，用水冲洗小玻杯几次，并将废液♂排除。如此反复冲洗干净后，即可行下个样●品的蒸馏。按以上方法用标准硫酸铵再做两次。另取2mL蒸馏水代替标准硫酸铵行空白测定二次。将各次蒸馏的锥︻形瓶起滴定。
3、未知样品及空白的蒸馏吸收
将消化好的蛋白样品三支，空白对照液三支，依次作蒸馏吸收。 加5mL热的蒸馏水至消化好的样品或空白对照液中，通过小玻杯加到反应室中，再用热蒸馏水洗涤小玻杯3次，每次╳用水量约3mL，洗涤液并倒入反应室内。其余操〇作按标准硫酸铵的蒸馏行。 由于消化液内硫酸钾浓度而呈粘稠状，不易从凯氏烧瓶内倒出，必须加入热蒸馏水5 mL稀释之，如果有结晶析出，必须微热溶解，趁热加入玻杯，使其◣流入反应室。此外，还应当注意趁仪器洗涤尚未全冷却时立即加入样品或空白对』照液，否则消化液通过冷却的管道容易析出结晶，成堵塞。
滴定
样品和空白蒸馏→毕后，起行滴定。打开接受瓶盖，用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的标准盐酸溶液行滴定。待滴至瓶内溶液呈暗灰色时，用蒸馏水将锥形瓶内壁四周淋▂洗次。若振摇后复现绿色，应再小心滴入标准盐酸溶液半滴，振摇观察瓶内溶液颜色变化，暗灰色在二分钟内不变，当视为到达滴定终点。若∑呈粉红色，表明已越滴定终点，可在已滴定耗用的标准盐酸溶液用量中减去0.02mL，每组样品的定氮终点颜色必须全致。空白对照液接受瓶内的溶液颜色不变或略有变化尚未出▲现绿色，可以不滴定。记录每次滴定耗用标准盐酸溶液毫升数，供计算用。
从凯氏定氮原理可以知道:凯氏定氮法是将含氮有机物转变为无机氮硫酸铵来行检测，以得到含氮量的测定值乘√以定系数得出蛋白质含量。而含氮有机物▽不仅仅是蛋白质，还有三聚氰胺等等。在加上食品中蛋『白质含量的现行家标准和际通行测定方法是经典凯氏定氮法，这就为假者提供了可乘之机。蛋白质中的含氮量↘不过30%，三聚氰胺的大的点是含氮量很(66%)，溶于水后◥无色无味，也就是说在杯清水中加入三聚氰胺，然后用凯氏定氮法检测，结果显示是含有蛋白质的。由于"凯氏定氮法"只能测出含氮量,并不能鉴定饲料中有无违规化学物质,所以,添加三聚氰胺的●奶粉理论上可以测出较的蛋白质含量。
功能点
凯氏定氮仪，采用微电脑㊣行过程控制，包括手动模式和自动模式，可根据您的需要自行设定和切换:
自动模式下:次成加碱、加硼酸、蒸馏，氨气吸收整个过程，加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。
人工模式下:加硼，加碱 和蒸馏吸收三ξ个过程可以单人工操作，体积，时间自行控制，满◥足业用户需求。
2.大屏幕点阵式液晶显示，全中文菜单，触摸式〓按钮，操作简捷方便。
3.自动式←蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水和水压过低报警。
4.各种安全保护:消化管安全门装置，蒸汽发生器缺水报警。
5.可存储操作程序。
6.仪器外壳采用制喷塑钢板，工作区域采用ABS防ξ 腐板及不锈钢底板。
7.防化学试剂腐蚀和机械损坏表面，耐酸耐碱。
8.水位检测、低↑水位报警，自动断电。
9.标配里不含消化炉，消化炉为选∮配，建议选择C型消化炉。
应用
凯氏定氮法的普遍适用性、性和可重复性已经得到了际的广泛认可。它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准方法。但是，这种方法并不能给出真实的蛋白质含量，因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的。这可以从2007年美宠物食品污染事件和2008年中毒奶粉事件等食品∩安全事件中被体现:三聚氰胺，种含氮量较的物质，被添加到了食品中以伪◥较的含氮量。另外，由于不同的氨基酸序列，这种方法也需要许多不同的校正因子。而且，凯氏定氮法还需要使用浓∞硫酸和较长时间的加热(般来讲，大于1小时)。这也成了在粗略测量蛋白◢质含量时，杜马斯法有时更方便些。
北京恒奥德仪器仪表有限公司主营 不锈钢采水器，罐底焊缝真空检测盒，读数仪，八空气微生物采样器，继电器综合测▓试仪，双波长扫描仪，涂层测厚☆仪，土壤粉碎机，钢化玻璃表面平整度测试仪，声音╳传感器，便携式电测水位计，网口流量计，腐蚀率仪，便携式划痕仪，凝固点测试仪，水质检测仪，在线氨》气测试仪，涂层测厚仪，涂层测厚仪，土壤粉碎机，数显』式温度计，气体采样Ψ 泵，陶瓷抗冲击试验机，全自动结※晶点测试仪，药物凝固点测试仪，干簧管测试仪，恒温水浴箱，汽油根转，气体采样泵，钢化玻璃测试仪，水质检测仪，PM2.5测试仪，可吸入颗粒物检测仪，频热合机，应变控制三轴仪，牛奶体细胞检测仪，氦气浓度检测仪，土壤水⌒分电导率测试仪，场强仪，采集箱，透色比测定仪，毛细吸水时间测定仪∏，氧化还原电位计 测振仪，氧化碳二氧化碳检测仪，CO2分析仪，示波谱仪，黏泥含量测试仪，汽车启动电源，自动电位滴定仪，便携式测温仪ζ，氧化锆分析仪，干簧管测试仪，精密电导率√仪，TOC水质分析仪，微电脑可塑性测定仪，风向站，全自动点样仪，土壤氧化还原电位计，数字测温仪，便携式总磷测试仪㊣ ，腐蚀率仪，安全阀研磨工具，公司秉承“顾客至上，锐意取”的经营理念↘，坚持“客户”的原则为广大客户提供优质的服务。欢迎惠顾!
