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                罗氏FFPE 组织切片核酸纯化试剂盒操作说明

                教育装备采购网 2015-05-18 16:06 围观1314次
                 

                High Pure FFPET DNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理,免去DNA沉淀和有机试剂抽提的步【骤,是快速核酸抽提的理想工具

                ?整个抽提过程仅需3小时(含脱蜡过程);
                ?获得高DNA得率和质量;
                ?在qPCR,芯片分析和测序等下游应用中获得强大信号。


                图1:从FFPET样本中获得高得率的DNA

                柱形△图显示了从3种不同乳腺癌或结肠癌异种移植组织的5um FFPET组织切片样品中获得的DNA平均得率。通常来说,在▓不同组织切片的样品个体间存在一定的DNA得率变异。

                图2:从样品中抽提获得▂高质量DNA,适用于多种下游应用。
                在HT29异种移植FFPET样︻本中抽提获得DNA,再进行100,200,300,400bp片段长度扩增子的多重PCR。
                泳道1和2:使用二甲苯进行脱蜡
                泳道3和4:使用十六烷进行脱蜡
                泳道5和6:多重PCR质控对照,核酸样品为人全血中抽提的完整基因组DNA
                图2:从※近期和长期保存的〇FFPET样品中均可抽提获得高RNA得率

                结果:所有泳道中均出现4个清晰的目标条带,表明High Pure FFPET DNA Isolation Kit能在FFPET样本中卐抽提获得高质量DNA,适用于CGH芯片分析,二代测序等对核酸模板→质量要求高的下游应用。

                图3:从样品中抽提获得高质量■DNA,提高qPCR检测灵敏度

                作为qPCR实验中的核酸模板,要求高质量DNA,即良好的核酸得率、纯度和片▲段大小分布,并能高灵敏度和不偏倚地检测到目标基因。取5ul DNA洗脱液,分别通过LightCycler 480 Real-Time PCR Instrument扩增检测CycA(442bp)或myo(89bp)基因片段。 
                结果:High Pure FFPET DNA Isolation Kit抽提获得的DNA样品能在qPCR研究中获得更高的检测灵敏度(提前出线的Cq值)。

                图4:将DNA应用于甲『基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)等前沿应用

                将不同肿瘤研♂究样本的DNA抽提物经重亚硫酸盐处理,通过LightCycler 480 Instrument进行APC基因的MS-HRM分析,不同肿瘤组织的APC基因具有不同程度的甲基化。

                结果:使用High Pure FFPET DNA Isolation Kit抽提获得的DNA是MS-HRM分析○的理想模板。在该研究中▓,共发现3中不同程度的甲基化范围:样本A的APC甲基化水平在10-100%,样本B的甲基化水平在0-1%,样本C的APC不存在甲基︾化。

                产品信息

                产品

                目录号

                包装规格

                High Pure FFPET DNA Isolation Kit

                06 650 767 001

                50次抽提反应。

                点击进入上海嘉鹏科技有限公司展台查看更多〗 来源:上海嘉鹏科技有限公司 我要投稿
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