试剂：

　　RNA提取缓冲液(CTAB)：2% CTAB(W/V)，2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)，100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置)，25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine，2.0M NaCl，2%巯基乙醇(V/V，使用前加入)。由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可。

　　SSTE：1 M NaCl，0.5% SDS(W/V)，10 mM Tris-HCl pH8.0，1.0 mM EDTA

　　10M LiCl 直接用蒸馏水配10M LiCl，加1‰的DEPC过夜后，高温灭菌。

　　3M NaAc

　　氯仿:异戊醇(24:1)

　　酚(pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)

　　DEPC处理水 用1‰的DEPC处理蒸馏水过夜，高温灭菌

　　无水乙醇

　　70%酒精

　　方法

　　1. 实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热，离心管中加入ME(巯基乙醇)(10mL加80ul，50mL中加入300ul)。

　　2.取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了)，在液氮中迅速磨成精细粉末，装入50 mL离心管，按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液，颠倒混匀。

　　3. 65℃水浴3-10 min，期间混匀2-3次

　　4. 加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000 rpm，4℃，5 min)

　　5. 取上清，等体积→的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000 rpm，4℃，5 min)

　　6. 加入1/4V体积10M LiCl溶液，4℃放置6hr以上(或过夜)

　　7. 10,000 rpm，4℃离心20 min

　　8. 弃上清，用500 ulSSTE溶解沉淀

　　9. 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次，氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000 rpm，4℃，5 min)

　　10. 加2V体积的无水乙醇，在-70℃冰箱沉淀30 min以上

　　11. 12,000 rpm，4℃离心20 min

　　12. 弃上清。沉淀用70%酒精漂洗一次，干燥

　　13. 加200 ul的DEPC处理水溶解

　　14. 用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

　　(在抽提过程中，若蛋白质含量或其它的杂质还较多，可以增加抽提次数)

　　注意：提取RNA请尽量在低温下操作，如果条件不容许，在室温下操作的时间要尽可能的短。