上海恒远悄悄告诉你:实验室抗原抗体反应的可逆性
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。在抗血清中,特异性的IgG 抗体仅占总IgG 中的极小部分。用亲和层析法提取的特异性抗体,称为亲和层析纯抗体,应用于免疫测定中可得到更好的效果。·最适比例
曲线的高峰部分是抗原抗体比例最合适的范围,称为≡等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原◆过剩带。
如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带,抗原地过量称为后带》。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
在测定血清中某一物质的含量№时,化学比色法的敏感度为 mg/ml 水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的▃敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml 水平。
在均相EIA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种╱条件下,抗原抗体反『应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相EIA在临床检验中较少应用。非均相EIA 需先进行游离的和♂结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫ζ 测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定,简称ELISA,在国内有译作酶联免疫吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
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